[發明專利]靶向OTUD7B基因的小干擾RNA在膠質瘤靶向治療中的應用

有效

• 申請號: 201910287712.9
• 申請日: 2019-04-11
• 公開（公告）號: CN110079528B
• 公開（公告）日: 2020-09-29
• 發明（設計）人: 張曉寧;時雨;平軼芳;譚瑤瑤;譚玉環;徐媛媛;卞修武
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍陸軍軍醫大學第一附屬醫院
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/867;C12N15/861;A61K31/7088;A61P35/00
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所(普通合伙) 11308
• 代理人: 黎昌莉

本發明提供了一種靶向OTUD7B基因的小干擾RNA及序列，通過使OTUD7B基因沉默，為研發靶向膠質瘤的靶向治療提供新策略；通過用靶向OTUD7B基因的小干擾RNA慢病毒載體感染膠質瘤細胞，抑制膠質瘤細胞增殖和膠質瘤生長，效果顯著。本發明還提供了一種靶向OTUD7B基因的小干擾RNA在制備治療膠質瘤藥物中的應用，具有重大的臨床應用價值和商業價值。最后本發明還提供一種治療膠質瘤的方法，基于RNAi技術靶向干擾膠質瘤中OTUD7B基因，為研發靶向膠質瘤的靶向治療新策略提供依據。

技術領域

本發明屬于醫藥領域，具體涉及一種靶向OTUD7B基因的小干擾 RNA在膠質瘤靶向治療中的應用。

背景技術

惡性膠質瘤是中樞神經系統常見的原發性腫瘤，惡性程度極高，患者生存期短、復發率高、治療困難。即使經過積極的放化療，其中位生存期仍只有14個月左右。惡性膠質瘤的發生和演進與腫瘤細胞內關鍵基因的異常表達密切相關。因此，針對惡性膠質瘤內異常表達的關鍵基因進行分子靶向治療，具有重要的治療學意義。

OTUD7B(OTU domain-containing protein 7B)(HGNC:16683Entrez Gene:56957Ensembl:ENSG00000264522OMIM:611748UniProtKB: Q6GQQ9)是一個去泛素化酶，于2001年被首次報道，目前報道的作用主要是通過去泛素化TRAF3(TNF ReceptorAssociated Factor 3)，抑制TRAF3 降解從而避免非經典NF-kB信號通路異常激活。OTUD7B基因在多種腫瘤中異常表達，參與調控腫瘤惡性生物學行為，但是在不同類型的腫瘤中發揮的作用不一。舉例來說，前期研究發現，肝細胞癌中OTUD7B是抑癌基因，其低表達提示腫瘤體積更大、衛星灶更多、TNM分期更晚且預后更差，這與OTUD7B抑制基質金屬蛋白酶MMP9(Matrix Metallopeptidase 9)的表達，進而抑制肝癌轉移有關。在肺癌研究中，OTUD7B起到了促癌的作用。在K-ras(Kirsten Rat Sarcoma Viral Oncogene Homolog)突變驅動的肺癌模型中，OTUD7B野生組在16～23周即出現自發肺癌結節，但在OTUD7B敲除組，其肺癌結節數量僅為野生組的50％，且腫瘤體積更小、生存期更長，該現象是由于OTUD7B使GβL泛素化水平降低，促進mTORC2(mTOR complex 2)復合體的形成，進而激活下游Akt信號通路導致的。然而， OTUD7B在膠質瘤中的作用目前尚無報道，以OTUD7B為治療靶點在惡性膠質瘤中的治療學意義也有待闡明。鑒于OTUD7B的異常表達是介導多種惡性腫瘤生物學行為的關鍵調控因素，設計并開發針對OTUD7B的靶向藥物能為膠質瘤的靶向治療提供新思路。

RNA干擾(RNA interference,RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由小干擾RNA(short interfering RNA)誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。利用質粒、病毒或細菌載體將短發夾RNA(shRNA)導入細胞，經細胞內加工處理后可形成與靶基因mRNA互補結合的短序列RNA分子，進而抑制靶基因蛋白翻譯，其優點在于可持續性、特異性干擾靶基因的表達。

有鑒于此，本發明提供了一種靶向OTUD7B基因的小干擾RNA在膠質瘤靶向治療中的應用，由于針對OTUD7B的靶向藥物尚未見報道，因此本發明具有重大的臨床應用價值和潛在的商業價值。同時，由于現在對于 OTUD7B的研究尚處于初始階段，因此本發明基于RNAi技術靶向干擾膠質瘤中OTUD7B，還能夠為研發靶向膠質瘤的靶向治療新策略提供依據。

發明內容

本發明的目的之一在于提供一種靶向OTUD7B基因的小干擾RNA，具體方案如下：

靶向OTUD7B基因的小干擾RNA，所述小干擾RNA的核苷酸序列如 SEQ ID NO：1所示。所述小干擾RNA為短發夾RNA(shRNA)，由發明人所在實驗室自主設計、合成。