[發明專利]一種解凍液在冷凍保存的卵母細胞或胚胎解凍中的應用

有效

• 申請號: 201910282415.5
• 申請日: 2019-04-09
• 公開（公告）號: CN111789102B
• 公開（公告）日: 2022-07-12
• 發明（設計）人: 嚴杰;喬杰;閆麗盈;李蓉;王健君;金晟琳
• 申請（專利權）人: 北京大學第三醫院;中國科學院化學研究所
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 北京知元同創知識產權代理事務所(普通合伙) 11535
• 代理人: 劉元霞

1.一種解凍液在冷凍保存的卵母細胞或胚胎解凍中的應用，其特征在于：每100mL解凍液含有仿生控冰材料0.1-50 g、水溶性糖 0-1.0 mol L^-1、緩沖液余量；

所述仿生控冰材料為PVA，或再進一步包含氨基酸、多肽、聚氨基酸中的至少一種或兩種以上的組合；

所述PVA選自無規PVA；所述PVA的間同規整度為45%-65 %；所述PVA選自分子量為10-500kDa或者更高分子量的PVA；所述PVA水解度為80%-99%。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述PVA水解度選自82-87%、87%-89%、89%-99%或98%-99%。

3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述氨基酸選自精氨酸、蘇氨酸、脯氨酸、賴氨酸、組氨酸、谷酰胺酸、天冬氨酸、甘氨酸中的一種或兩種以上的組合。

4.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述多肽選自L-Thr-L-Arg、L-Thr-L-Pro、L-Arg-L-Thr、L-Pro-L-Thr、L-Thr-L-Arg-L-Thr、L-Thr-L-Pro-L-Thr、L-Ala-L-Ala-L-Thr或L-Thr-L-Cys-L-Thr中的一種或兩種以上。

5.根據權利要求1-4任一項所述的應用，其特征在于，所述仿生控冰材料含量為1.0-40g。

6.根據權利要求1-4任一項所述的應用，其特征在于，所述仿生控冰材料包括PVA 1.0-6.0 g。

7.根據權利要求1-4任一項所述的應用，其特征在于，所述仿生控冰材料包括氨基酸1.0-40 g，所述氨基酸為精氨酸與蘇氨酸組合而成。

8.根據權利要求1-4任一項所述的應用，其特征在于，所述仿生控冰材料包括聚氨基酸0.1-8.0 g。

9.根據權利要求1-4任一項所述的應用，其特征在于，所述仿生控冰材料包括多肽1.0-40 g。

10.根據權利要求1-4任一項所述的應用，其特征在于，所述仿生控冰材料是PVA與所述氨基酸、多肽、和/或聚氨基酸的組合。

11.根據權利要求1-4任一項所述的應用，其特征在于，每100 mL解凍液中所述水溶性糖含量為0.1-1.0 mol L^-1。

12.根據權利要求11所述的應用，其特征在于，所述水溶性糖選自非還原性雙糖、水溶性多糖、糖酐中的至少一種。

13.根據權利要求12所述的應用，其特征在于，所述水溶性糖選自蔗糖、海藻糖。

14.根據權利要求1-4任一項所述的應用，其特征在于，所述緩沖液選自DPBS或hepes-buffered HTF緩沖液中的至少一種。

15.根據權利要求1-4任一項所述的應用，其特征在于，將冷凍的卵母細胞或胚胎放入37℃解凍液I中復蘇3-5分鐘，然后常溫下依次放入解凍液II、解凍液III、解凍液IV中各3-5分鐘；所述解凍液I-IV具有如權利要求1-4任一項所述解凍液的組成。

16.根據權利要求15所述的應用，其特征在于，所述解凍液II中仿生控冰材料的含量為解凍液I中的 50%-100%，所述解凍液III中仿生控冰材料的含量為解凍液II中的 50%-100%。

17.根據權利要求16所述的應用，其特征在于，所述解凍液I-IV中，含有PVA 1.0-6.0g。