[發(fā)明專利]一種由黃曲霉次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離得到的化合物

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910281024.1
• 申請(qǐng)日: 2019-04-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110128392A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-08-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫坤來(lái);張譯文;宮凱凱;趙成英
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 嘉興市爵拓科技有限公司
• 主分類號(hào): C07D311/76
• 分類號(hào): C07D311/76;C12P17/06;A61P31/04;A61P29/00;C12R1/67
• 代理公司: 北京國(guó)翰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11696
• 代理人: 衛(wèi)翠婷

1.一種由黃曲霉次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離得到的化合物，其特征在于：所述黃曲霉擴(kuò)大培養(yǎng)過(guò)程中，對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行蒸氣加壓滅菌和紫外線滅菌；所述蒸氣加壓滅菌前處理為：在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加N(e)-Boc-L-賴氨酸和氮酮，于45-60℃熱激活10-15min。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種由黃曲霉次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離得到的化合物，其特征在于：所述黃曲霉擴(kuò)大培養(yǎng)的步驟為：

1)配制發(fā)酵培養(yǎng)基：所述發(fā)酵培養(yǎng)基組成為：每1L自來(lái)水中含有8-12g/L葡萄糖，18-22g/L麥芽糖，18-20g/L甘露醇，8-11g/L谷氨酸單鈉，0.3-0.6g/L KH₂PO₄，0.1-0.5g/LMgSO₄·7H₂O，1-5g/L酵母抽提物和25-35g/L SEA鹽；所述培養(yǎng)基pH為7；

2)將發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行蒸氣加壓滅菌；

3)將發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行紫外線照射10-15min；

4)將PDA固體培養(yǎng)基收集菌落轉(zhuǎn)移至發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)：25-32℃，100％相對(duì)濕度下，培養(yǎng)18-35天。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種由黃曲霉次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離得到的化合物，其特征在于：所述N(e)-Boc-L-賴氨酸的濃度為10-60mmol/L，添加比例為發(fā)酵培養(yǎng)基0.5-0.8％；所述氮酮為體積分?jǐn)?shù)0.1-1％，添加比例為發(fā)酵培養(yǎng)基0.05-0.1％。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種由黃曲霉次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離得到的化合物，其特征在于：所述與菌落一同轉(zhuǎn)入發(fā)酵液中的還有葡聚糖酶和蟲(chóng)草素，分別為發(fā)酵液質(zhì)量分?jǐn)?shù)的0.1-0.3％和0.02-0.05％。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種由黃曲霉次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離得到的化合物，其特征在于：所述黃曲霉來(lái)源為從凡納濱對(duì)蝦中分離得到的真菌菌株黃曲霉OUCMDZ-2205。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種由黃曲霉次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離得到的化合物，其特征在于：所述黃曲霉OUCMDZ-2205菌株的獲取方法為：將凡納濱對(duì)蝦樣品依次用60-80％乙醇和無(wú)菌海水洗滌；經(jīng)研缽搗碎，無(wú)菌水稀釋，稀釋液均勻涂布在馬鈴薯右旋糖上；采用PDA固體培養(yǎng)基26-29℃下培養(yǎng)7-9天；收集并純化菌落。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種由黃曲霉次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離得到的化合物，其特征在于：所述化合物為淡黃色固體，分子式為C₁₆H₁₈O₆；該化合物具有如下結(jié)構(gòu)：

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種由黃曲霉次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離得到的化合物，其特征在于：所述化合物的提取方法為：將發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵液經(jīng)粗棉布過(guò)濾分離得菌絲和濾液；所述濾液用等效體積的乙酸乙酯萃取2-3次得乙酸乙酯溶液1；所述菌絲用75-85％丙酮提取2-3次，丙酮溶液經(jīng)減壓濃縮，以乙酸乙酯萃取2-3次得到乙酸乙酯溶液2；所述乙酸乙酯溶液1和溶液2經(jīng)合并，減壓濃縮，得到乙酸乙酯溶液提取物。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種由黃曲霉次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離得到的化合物，其特征在于：所述化合物的分離純化方法為：將乙酸乙酯溶液提取物進(jìn)硅膠VLC柱，逐步洗脫：采用石油醚-CH₂Cl₂和CH₂Cl₂-MeOH逐步洗脫得八個(gè)主要餾分：餾分1～8；所述餾分3經(jīng)RP-18硅膠柱采用CH₂Cl₂-MeOH(88-91:1)梯度洗脫得餾分3.1～3.4，餾分3.1進(jìn)一步用Sephadex LH-20純化，CH₂Cl₂-MeOH(1-2:1)洗脫，得到餾分3.1.1～3.1.3；餾分3.1.3用半制備的HPLC純化，用75-85％MeOH-H₂O洗脫，得到目標(biāo)化合物。

10.一種由黃曲霉次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離得到的化合物在抗菌劑中的用途。