[發(fā)明專利]一種重組刺參膠原多肽、制備方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910279919.1
• 申請(qǐng)日: 2019-04-09
• 公開（公告）號(hào): CN109867721B
• 公開（公告）日: 2020-11-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張晨;陳枝輝;張楚晗;王玉玨;唐月婷;賀韶欽;張坤;洪曉林;賈力;王宗華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 閩江學(xué)院
• 主分類號(hào): C07K14/78
• 分類號(hào): C07K14/78;C12N15/70;C12N1/21;C07K1/34;A61K8/65;A61Q19/08;C12R1/19
• 代理公司: 福州旭辰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 35233
• 代理人: 唐杏姣

1.一種重組刺參膠原多肽，其特征在于，編碼所述重組刺參膠原多肽的核苷酸序列為SEQ ID NO：2，編碼所述重組刺參膠原多肽的核苷酸序列翻譯對(duì)應(yīng)的重組刺參膠原多肽的氨基酸序列為SEQ ID NO：1所示。

2.一種包含編碼重組刺參膠原多肽的核苷酸序列的質(zhì)粒，其特征在于，所述質(zhì)粒中包含編碼權(quán)利要求1中所述重組刺參膠原多肽的核苷酸序列。

3.一種表達(dá)重組刺參膠原多肽的基因工程菌，其特征在于，包含權(quán)利要求2所述的質(zhì)粒。

4.一種權(quán)利要求1中所述重組刺參膠原多肽的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、克隆基因：獲得人工合成的編碼所述重組刺參膠原多肽的核苷酸序列；

S2、構(gòu)建載體質(zhì)粒：用限制性內(nèi)切酶切割載體質(zhì)粒，使編碼重組刺參膠原多肽的核苷酸序列和載體質(zhì)粒具有相同粘性末端，然后通過DNA連接酶將目的基因序列整合到載體質(zhì)粒中，并將整合質(zhì)粒導(dǎo)入至感受態(tài)基因工程菌中；

S3、發(fā)酵及菌體收集：選取所述步驟S2中獲得的陽性基因工程菌克隆，置于培養(yǎng)基中培養(yǎng)至菌體達(dá)目標(biāo)濃度，然后收集菌體；

S4、純化與透析：將所述步驟S3中收集到的菌體去除雜質(zhì)后，進(jìn)行蛋白純化操作，再進(jìn)行蛋白透析操作。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的重組刺參膠原多肽的制備方法，其特征在于，還包括步驟S5檢測(cè)：將純化與透析后獲得的重組刺參膠原多肽溶液進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)。

6.根據(jù)權(quán)利要求4至5任意一項(xiàng)中制備獲得的重組刺參膠原多肽產(chǎn)品。

7.一種含有權(quán)利要求6中的所述重組刺參膠原多肽產(chǎn)品的護(hù)膚品。

8.一種刺參膠原多肽抗皺霜，其特征在于，包括以下重量份的各組分：

A相：60-69份水；

B相：3-6份植物角鯊?fù)椋?-12份霍霍巴油，0.3-0.6份的茉莉精油，0.2-0.6份維生素E；

C相：8-12份的透明質(zhì)酸，0.8-1.2份的海藻糖，2-3份的煙酰胺，0.2-0.8份的膠原多肽；

D相：0.5-1.2份乳化劑；

其中所述膠原多肽為權(quán)利要求4至5任意一項(xiàng)中制備所得的重組刺參膠原多肽。

9.一種權(quán)利要求8所述刺參膠原多肽抗皺霜的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）按照重量份比例稱取A相，然后將C相的各組分按重量份比例稱量好并依次溶于A相中，得混合液1；

（2）按重量份比例稱取B相中各組分，混合后得混合液2；

（3）將所述步驟（2）中制得混合液2緩緩加入所述步驟（1）的混合液1中，輕輕攪拌，加入按重量份比例稱量好的D相，然后置于均質(zhì)乳化機(jī)1000rpm反應(yīng)10min，得到抗皺霜成品，無菌條件下分裝保存。