[發明專利]一種硫酸化涼粉草多糖及其制備方法

有效

• 申請號: 201910278441.0
• 申請日: 2019-04-08
• 公開（公告）號: CN110003351B
• 公開（公告）日: 2020-04-24
• 發明（設計）人: 謝建華;黃莉鑫;申明月;余強;陳奕;黃容
• 申請（專利權）人: 南昌大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P39/06
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 袁紅梅

本發明涉及多糖的結構改造技術領域，具體涉及一種硫酸化涼粉草多糖及其制備方法，屬于多糖的結構改造技術領域。提取、純化涼粉草多糖，用氯磺酸?吡啶法進行硫酸化修飾，以產物對RAW264.7細胞的保護作用為指標，用正交實驗對試劑配比、反應溫度和反應時間三個因素進行優選，確定最佳修飾條件為氯磺酸與吡啶的質量比1∶2，反應溫度60℃，反應時間90min，所得硫酸化涼粉草多糖對RAW264.7細胞的保護作用最強，可以通過提高SOD的水平和降低MDA的含量發揮保護作用。本發明能顯著提高涼粉草多糖對RAW264.7細胞氧化應激的保護作用。

技術領域

本發明屬于多糖的結構改造技術領域，具體涉及一種硫酸化涼粉草多糖及其制備方法。

背景技術

多糖廣泛存在于動物、植物和微生物組織中，是由單糖聚合而成的天然高分子化合物，是生物體內除蛋白質和核酸外又一類重要的生物大分子，具有抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、免疫調節等生物活性。多糖的生物活性與其結構有著密切的關系，特別是當引入某些化學基團時，使糖鏈的柔韌性和空間結構發生變化，從而引起多糖的生物學活性改變或使多糖產生新的活性。因此，對多糖結構進行適當的化學修飾是多糖領域研究的熱點。

多糖的化學修飾主要有硫酸化、磷酸化、硒化等方法。由于硫酸化修飾能顯著影響多糖的活性而倍受關注。常用硫酸化修飾方法有濃硫酸法、氯磺酸-吡啶法、氯磺酸-甲酰胺法、三氧化硫-吡啶法等。其中氯磺酸-吡啶法以其試劑易制備、反應條件相對簡單、產物回收方便等優點而最為常用。

涼粉草又名仙草，在中國已被用作重要的醫藥和食用植物資源，通常用作草藥茶和果醬型甜點和食用凝膠生產中的食品成分。多糖是涼粉草的主要成分之一，能同其他食用膠進行復配，具有功能互補、協同增效的作用，借此可以開發有增稠、膠凝、充當膳食纖維等許多功能的一系列食品添加劑，使其可以更經濟、有效地應用于食品加工領域并發揮重要的作用。同時，涼粉草多糖具有多種生物活性，包括抗腫瘤，抗病毒，降血糖，免疫調節等功效，而涼粉草多糖對RAW264.7細胞氧化應激的保護作用效果不太顯著。在已有中國專利申請中，專利申請號為“201210461709.2”，名為“涼粉草多糖及其制備方法和其應用”的專利，申請號為“201810815176.0”名稱為“一種涼粉草酸性多糖的脫色方法”的申請以及專利申請號為“201811113554.7”，名稱為“一種涼粉草多糖含量的檢測方法”的申請，主要是涼粉草多糖的制備，以及多糖精制及多糖含量的測定方面的研究。到目前為止，尚未見到涼粉草多糖化學修飾的文獻報道，也未見通過化學修飾的方法提高涼粉草多糖對RAW264.7氧化應激的保護作用的文獻報道。

本發明首次對涼粉草多糖進行硫酸化修飾，建立了涼粉草多糖的硫酸化修飾方法，基于產物對RAW264.7細胞氧化應激的保護作用優化了修飾條件，發現硫酸化修飾能顯著提高涼粉草多糖對RAW264.7細胞氧化應激的保護作用。

發明內容

技術問題本發明針對多糖生物活性低的問題，提供一種提高涼粉草多糖對RAW264.7細胞氧化應激保護作用的硫酸化修飾方法，達到顯著提高涼粉草多糖對RAW264.7細胞氧化應激的保護作用的目的。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案是：

一種硫酸化涼粉草多糖，所述硫酸化涼粉草多糖采用氯磺酸-吡啶法對涼粉草多糖進行硫酸化修飾，其取代度為0.52，可提高RAW264.7細胞氧化應激保護作用。

進一步地，所述氯磺酸-吡啶法的修飾條件為氯磺酸與吡啶的體積比1∶2，反應溫度60℃，反應時間2h。

上述硫酸化涼粉草多糖的制備方法，包括以下步驟：

A.涼粉草多糖的提取：涼粉草粉碎后用9倍體積的80％乙醇浸泡20h，殘渣陰涼處風干；預處理后的涼粉草加入15倍體積的水溶液，沸水提取2h，上清液用120目紗布過濾，濾渣重復提取2次，合并濾液，濃縮離心，得到涼粉草粗多糖溶液；