[發明專利]一種柑橘遺傳背景鑒定用PCR引物、試劑盒及鑒定方法有效
| 申請號: | 201910273390.2 | 申請日: | 2019-04-05 |
| 公開(公告)號: | CN110144419B | 公開(公告)日: | 2021-05-18 |
| 發明(設計)人: | 潘志勇;樊正炎;彭抒昂;鄧秀新 | 申請(專利權)人: | 華中農業大學 |
| 主分類號: | C12Q1/6895 | 分類號: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司: | 武漢泰山北斗專利代理事務所(特殊普通合伙) 42250 | 代理人: | 程千慧 |
| 地址: | 430070 湖*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 柑橘 遺傳 背景 鑒定 pcr 引物 試劑盒 方法 | ||
1.一種柑橘遺傳背景鑒定方法,其特征在于,使用包含柑橘遺傳背景鑒定用PCR引物的試劑盒 ,該方法為:提取柑橘待測樣品的DNA,用所述柑橘遺傳背景鑒定用PCR引物進行PCR擴增,然后采用瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR擴增產物,當擴增產物中出現一條擴增條帶時,若條帶大小為1.8K判定為具有柚的遺傳背景,若條帶大小為1.4K判定為具有橘的遺傳背景,若條帶大小為1K判定為具有原始柑橘的遺傳類型,當擴增產物中出現兩條擴增條帶時,根據孟德爾遺傳規律進行判定,所述柑橘遺傳背景鑒定用PCR引物包括上游引物Citrus-F和下游引物Citrus-R,其核苷酸序列分別為SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2,所述原始柑橘包括枳、莽山野柑、枸櫞、宜昌橙。
2.根據權利要求1所述的一種柑橘遺傳背景鑒定方法,其特征在于,所述待測樣品為待測柑橘的葉片。
3.根據權利要求2所述的一種柑橘遺傳背景鑒定方法,其特征在于,PCR擴增的反應程序為:95℃預變性3分鐘,95℃變性15秒,56℃復性15秒,72℃延伸2分鐘,共35個循環,最后72℃延伸5分鐘。
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