[發明專利]桃生長素酰胺水解酶基因PpIAAH1及其應用

在審

• 申請號: 201910272923.5
• 申請日: 2019-04-04
• 公開（公告）號: CN110004165A
• 公開（公告）日: 2019-07-12
• 發明（設計）人: 曾文芳;王志強;王小貝;牛良;潘磊;崔國朝;魯振華;王雁;鄧麗
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院鄭州果樹研究所
• 主分類號: C12N15/55
• 分類號: C12N15/55;C12N9/78;C12N15/82;A01H5/08;A01H5/00;A01H6/82
• 代理公司: 鄭州大通專利商標代理有限公司 41111
• 代理人: 陳勇

本發明屬于植物基因工程技術領域，涉及桃生長素酰胺水解酶基因PpIAAH1及其應用。本發明通過克隆桃生長素酰胺水解酶基因家族成員，分析該基因在溶質型桃果實成熟過程中的表達模式，最后用農桿菌介導的方法轉入Micro?Tom番茄中驗證目的基因的功能，有利于從分子機制上闡明在桃成熟過程中的生長素信號的響應機制，對進一步實現桃有目的、有針對性的品質和性狀改良，培育桃新品種，具有積極的指導作用。

技術領域

本發明屬于植物基因工程技術領域，涉及桃生長素酰胺水解酶基因PpIAAH1及其應用。

背景技術

生長素是一類低分子量有機酸，由一個芳香環和一個羧基基團組成，植物體中含量最多的生長素是IAA。生長素在植物生長發育的許多生理過程中起重要作用，如植物的極性建立和維持，頂端優勢、向光性、向重力性和果實形成（Woodward and Bartel, 2005;Vanneste and Friml, 2009）。

桃[Prunus persica (L). Batsch]果實一般為溶質型（melting flesh，MF），屬于呼吸躍變型果實，在乙烯躍變后迅速軟化，達到商品成熟，而硬質型桃果實成熟期（stonyhard，SH）沒有乙烯躍變高峰，果實不變軟。外源萘乙酸處理可引起硬質型桃果實成熟軟化，證明了生長素在此過程中的作用。研究發現，硬質桃1-氨基環丙烷-1-羧酸（1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid，ACC）合成酶基因PpACS1（ACC synthase）的表達在果實成熟期始終處于較低的水平，致使乙烯合成受阻，而溶質桃PpACS1基因的表達量隨果實的成熟迅速上升。

生長素酰胺水解蛋白家族能夠催化生長素氨基酸結合態（IAA-Ala、IAA-Leu等）中的酰胺鍵水解從而釋放出有生物活性的游離態IAA，通過調節組織中游離IAA的含量，進而調控植物生長發育。研究表明擬南芥、蕪菁、蒺藜苜蓿等物種中的生長素酰胺水解蛋白蛋白家族成員分別參與了胚軸的延伸、側根發生、菌類侵染響應和根瘤產生等過程。

發明內容

本發明的目的之一在于提供桃生長素酰胺水解酶基因PpIAAH1及其所編碼的蛋白。

本發明的目的之二在于提供桃生長素酰胺水解酶基因PpIAAH1的重組載體。

本發明的目的之三在于提供桃生長素酰胺水解酶基因PpIAAH1及其所編碼的蛋白、重組載體在番茄育種中的應用，具體涉及在改變番茄株型、改變番茄果形或促進番茄果實成熟方面的應用。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

本發明提供桃生長素酰胺水解酶基因PpIAAH1，其序列如SEQ ID NO:1所示。

本發明還提供桃生長素酰胺水解酶基因PpIAAH1編碼的蛋白，其氨基酸序列如SEQID NO:2所示。

本發明還提供包含所述桃生長素酰胺水解酶基因PpIAAH1的重組載體。

優選地，所述重組載體為農桿菌表達載體。

本發明還提供桃生長素酰胺水解酶基因PpIAAH1、桃生長素酰胺水解酶基因PpIAAH1編碼的蛋白及桃生長素酰胺水解酶基因PpIAAH1的重組載體在番茄育種中的應用。

優選地，所述番茄育種為改變番茄株型、改變番茄果形或促進番茄果實成熟。