[發(fā)明專利]誘導分化細胞成多潛能內(nèi)胚層干細胞的方法及其應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910272425.0 | 申請日： | 2019-04-04 |
| 公開（公告）號： | CN111778213B | 公開（公告）日： | 2022-06-28 |
| 發(fā)明（設計）人： | 程新;鄧小剛;吳佳穎;付天龍 | 申請（專利權）人： | 中國科學院分子細胞科學卓越創(chuàng)新中心 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10;C12N5/0735;A61K35/545;A61P1/16;A61P1/00;A61P3/10;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 上海一平知識產(chǎn)權代理有限公司 31266 | 代理人： | 王正君;徐迅 |
| 地址： | 200031 上海*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 誘導 分化 細胞 潛能 胚層 干細胞 方法 及其 應用 | ||
1.一種誘導人類分化細胞分化為誘導多潛能內(nèi)胚層干細胞（smEnSC）的方法，其特征在于，包括步驟：
(a) 在第一培養(yǎng)條件下，在培養(yǎng)體系中培養(yǎng)分化細胞，從而獲得誘導多潛能內(nèi)胚層干細胞（smEnSC）；其中，所述培養(yǎng)體系包括EGF、A83-01和CHIR99021；
所述分化細胞為Eheps細胞；
所述第一培養(yǎng)條件含有第一培養(yǎng)基；
所述第一培養(yǎng)基選自下組：SFD、DMEM、DMEM/F12、或其組合；
(b)將誘導多潛能內(nèi)胚層干細胞（smEnSC）分化為內(nèi)胚層衍生細胞。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述分化為退分化。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述培養(yǎng)體系還包括選自下組的一種或多種添加物：抗壞血酸磷酸鎂（Ascorbic Acid Phosphate Magnesium）、L-谷氨酰胺（L-glutamine）、MTG、bFGF。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述內(nèi)胚層衍生細胞為肝實質(zhì)細胞、膽管上皮細胞、小腸上皮細胞或胰島細胞。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(a)中，將分化細胞在第一培養(yǎng)條件下培養(yǎng)3-18天。
6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，將分化細胞在第一培養(yǎng)條件下培養(yǎng)4-16天。
7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，將分化細胞在第一培養(yǎng)條件下培養(yǎng)6-12天。
8.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述培養(yǎng)體系中不含有或含有很少的細胞外基質(zhì)。
9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，在培養(yǎng)體系中，所述細胞外基質(zhì)的含量（v/v）為0.5%－5%。
10.如權利要求9所述的方法，其特征在于，在培養(yǎng)體系中，所述細胞外基質(zhì)的含量（v/v)為1%—3%。
11.如權利要求10所述的方法，其特征在于，在培養(yǎng)體系中，所述細胞外基質(zhì)的含量（v/v)為1%－2%。
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