[發明專利]一種糖蛋白質控品的制備方法

在審

• 申請號: 201910271440.3
• 申請日: 2019-04-04
• 公開（公告）號: CN109988221A
• 公開（公告）日: 2019-07-09
• 發明（設計）人: 張翼;陽馨瀅;劉俊鵬
• 申請（專利權）人: 廣東菲鵬生物有限公司
• 主分類號: C07K1/00
• 分類號: C07K1/00;C07K1/14
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 王煥

本發明涉及質控品制備領域，具體而言，涉及一種糖蛋白質控品的制備方法，包括以下步驟：待分離糖蛋白溶液與高氯酸反應，得到反應液；所述反應液進行破碎處理，然后經分離得到含有糖蛋白的溶液；含有所述糖蛋白的溶液進行透析即得。本發明提供的糖蛋白質控品的制備方法，能有效提升目的蛋白的得率，且重復性和穩定性好。

技術領域

本發明涉及質控品制備領域，具體而言，涉及一種糖蛋白質控品的制備方法。

背景技術

體外診斷試劑是通過對人體的樣品(組織、體液、血液、代謝物等)進行體外檢測并獲取臨床輔助診斷信息的產品。目前，我國體外診斷試劑市場規模每年約為50億左右，年增長率為20％～30％，遠遠高于歐美等發達國家12％的增長速度，國內的體外診斷試劑是一個巨大的市場。腫瘤診斷試劑在臨床上需求量很多，是許多診斷試劑生產廠家的重要產品，所以腫瘤標志物診斷原材料市場廣闊，跨國公司占據了該市場的大部分份額。

腫瘤標志物(Tumor Marker)是反映腫瘤存在的化學類物質,它們或不存在于正常成人組織而僅見于胚胎組織，或在腫瘤組織中的含量大大超過在正常組織里的含量，它們的存在或量變可以提示腫瘤的性質，借以了解腫瘤的組織發生、細胞分化、細胞功能，以幫助腫瘤的診斷、分類、預后判斷以及治療指導。糖類抗原(carbohydrate antigen，CA)是腫瘤標志物中的一大類，通常包括CA50、CA125、CA724、CA199、CA153等。

質控品是專門用于質量控制目的的標本或溶液，不能用作校準。它是為了使用戶能夠及時了解檢測系統的使用現狀而額外配置的。制備質控品所用的基礎材料一般為來自人或動物的血清，有的時候也使用其它體液。從基體差異性考慮，質控品最好來自于人體。對一般質控品而言，穩定性是其最重要的指標。好的質控品可以在規定的保存條件下保存1到2年。另外，質控品的專用性很強，往往只有提供公司的定值。因此，用于日常質量控制的質控品都不需要也沒有必要有定值的可追溯性。生產質控品著名的Bio-rad公司宣稱其公司所有的質控品均不具有計量上的可追溯性，而且這也符合ISO 17511的要求。

發明內容

本發明的目的在于提供一種糖蛋白質控品的制備方法。

為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：

第一方面，本發明提供的一種糖蛋白質控品的制備方法，包括以下步驟：

待分離糖蛋白溶液與高氯酸反應，得到反應液；

所述反應液進行破碎處理，然后經分離得到含有糖蛋白的溶液；

含有所述糖蛋白的溶液進行透析即得。

本發明提供的糖蛋白質控品的制備方法，相比于現有的非質控品糖蛋白質的制備方法，增加了破碎處理的步驟，這是由于本發明人在實際操作中發現，待分離糖蛋白溶液與高氯酸反應過程中，生成凝膠狀物質，而經過破碎處理后，可以使反應液的成分分散，便于目的蛋白的分離，有效提升了目的蛋白的得率。

第二方面，本發明在高氯酸處理前還增加以下步驟：

對所述待分離糖蛋白溶液先在-20℃±5℃預冷10-25min，然后與高氯酸反應。該步驟進一步顯著提升目的蛋白的得率。

第三方面，本發明發現，經高氯酸提純后得到的糖蛋白溶液無需加堿中和，得率反而提高。

本發明中糖蛋白可選糖類抗原，優選為CA50、CA125、CA724、CA199和CA153中的任一種。

與現有技術相比，本發明的有益效果為：

(1)本發明在待分離糖蛋白溶液與高氯酸反應后增加對反應液進行破碎的步驟，有效提高糖蛋白的得率。

(2)本發明在待分離糖蛋白溶液與高氯酸反應前，增加對待分離糖蛋白溶液-20℃±5℃預處理，有效提高糖蛋白的得率。