[發明專利]一種抗遲緩愛德華氏菌的TAT-EseD重組蛋白及用途

在審

• 申請號: 201910264564.9
• 申請日: 2019-04-03
• 公開（公告）號: CN110003345A
• 公開（公告）日: 2019-07-12
• 發明（設計）人: 孫金生;薛淑霞;魏俊利;董學旺
• 申請（專利權）人: 天津師范大學
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;A61K39/02;A61P31/04
• 代理公司: 天津一同創新知識產權代理事務所(普通合伙) 12231
• 代理人: 陸藝

本發明公開了一種抗遲緩愛德華氏菌的TAT?EseD重組蛋白及用途，抗遲緩愛德華氏菌的TAT?EseD重組蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本發明的抗遲緩愛德華氏菌的TAT?EseD重組蛋白，其中的TAT可以攜帶EseD蛋白進入細胞，增強EseD蛋白作為亞單位疫苗的免疫水平，顯著提高激發EseD蛋白特異性細胞毒性淋巴細胞反應水平，對于海水養殖魚類遲緩愛德華氏菌病有更高、更長久的保護效果；利用大腸桿菌表達TAT?EseD重組蛋白，表達量大，操作簡單，成本低，安全性好。

技術領域

本發明屬于基因生物工程技術領域，具體涉及一種抗遲緩愛德華氏菌的TAT-EseD重組蛋白及用途。

背景技術

遲緩愛德華氏菌病主要是由遲緩愛德華氏菌感染引起的，在各個重要的經濟魚類如大菱鲆、褐牙鲆、日本鰻鱺和斑點叉尾鮰等都有該病害報道。該病害爆發能引起大量魚類死亡，對養殖業造成嚴重的經濟損失。

遲緩愛德華氏菌病至今沒有有效的藥物，主要以預防為主。但是在實際的養殖生產中，養殖魚類發生疾病時，濫用、錯用漁藥的情況十分普遍。長期濫用藥物不僅使藥物的效果受到了限制，還可誘發病原微生物產生抗藥性，導致“無藥可用”，更嚴重的是藥物在養殖動物體內殘留和養殖環境的進一步污染。隨著人們對食品安全和環境安全的重視，消除水產品藥物殘留隱患的抗病技術研究已顯得尤為重要。疫苗作為抗生素的替代品，可使魚類高特異抵御病原的攻擊，減少魚類病害的發生，保護生態環境，可以說魚類疫苗的開發和應用具有重要而深遠的意義。

魚類疫苗根據制作工藝的不同，可以分為滅活疫苗、活菌疫苗(弱、減毒疫苗)和基因工程疫苗。滅活疫苗和活菌疫苗是利用物理或化學方法處理病原，使其失活或失去致病力，這種疫苗的優點是制備簡單，免疫保護效果較好，但是存在著免疫力不持久和毒力會回復等缺陷。隨著生物學技術的發展，基因工程疫苗的優勢受到大家的關注。基因工程疫苗是利用基因工程的方法改造或重組病原體基因獲得重組蛋白、質粒或完整病原體所構成的新型疫苗。

能刺激動物機體產生抗體和效應性淋巴細胞并能與之結合引起特異性免疫反應的物質被稱為抗原。作為微生物抗原的細菌，其結構比較復雜，可以看做是由多種抗原成分構成的復合體。

EseD分子量約為21.1kD，不含信號肽，為親水性蛋白，是遲緩愛德華氏菌具有顯著性保護效應的抗原蛋白之一，能夠誘導魚體產生特異性抗體。TAT是艾滋病病毒(HIV-1)的反式轉錄激活催化劑，已經成功地攜帶多肽、熒光標記蛋白、DNA及小分子藥物等，實現體內外的跨膜遞送。

但目前尚未有用TAT和EseD制備重組蛋白制成預防海水養殖魚類遲緩愛德華氏菌感染疫苗的報道。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術的不足，提供一種抗遲緩愛德華氏菌的TAT-EseD重組蛋白。

本發明的第二個目的是提供一種編碼抗遲緩愛德華氏菌的TAT-EseD重組蛋白的基因。

本發明的第三個目的是提供一種含有編碼抗遲緩愛德華氏菌的TAT-EseD重組蛋白的基因的重組基因工程菌。

本發明的第四個目的是提供抗遲緩愛德華氏菌的TAT-EseD重組蛋白在制備抗遲緩愛德華氏菌病疫苗中的用途。

本發明的技術方案概述如下：

一種抗遲緩愛德華氏菌的TAT-EseD重組蛋白，所述重組蛋白的氨基酸序列如SEQID NO.2所示。

編碼抗遲緩愛德華氏菌的TAT-EseD重組蛋白的基因，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。