[發明專利]一種葡萄新品種快速培育的方法

在審

• 申請號: 201910264212.3
• 申請日: 2019-04-03
• 公開（公告）號: CN109906868A
• 公開（公告）日: 2019-06-21
• 發明（設計）人: 張付春;鐘海霞;伍新宇;唐懷君;潘明啟;郝敬喆;師瑋;孟阿靜;梅闖;周曉明;許娟;張雯;韓守安
• 申請（專利權）人: 新疆農業科學院園藝作物研究所
• 主分類號: A01G17/02
• 分類號: A01G17/02;A01G13/00;A01H1/02;A01H4/00;C05G1/00;C05G3/00
• 代理公司: 哈爾濱市文洋專利代理事務所(普通合伙) 23210
• 代理人: 吳國清

1.一種葡萄新品種快速培育的方法，其特征在于葡萄培育的方法按照以下步驟進行：

一、雜交：

a、父本花粉采集

5月上旬采集莫利莎葡萄的花粉；

b、母本去雄

5月中旬將50穗白木納格葡萄標記，去雄后套袋；

c、雜交授粉

兩天后的早晨，用莫利莎的花粉給去雄的白木納格授粉，間隔一天重復一次；

二、雜交胚珠及成苗培養：

d、取胚

準備培養基：以1L Nitsch培養基為基本培養基，添加2.0mg IBA、0.5mg GA₃、0.5mg 6-BA、1.0g活性炭，各30毫升分裝于玻璃三角瓶中，高溫滅菌；

當年7月初，采集白木納格與莫利莎雜交后的果實，果粒留果柄從果穗剪下，用自來水、無菌水沖洗果實兩遍，晾干10分鐘，用75％的酒精浸泡果粒并攪動5分鐘，送進超凈工作室，在超凈工作室中將浸泡果粒的酒精倒入500ml空杯，倒200ml酒精到另一個500ml玻璃杯中，再將果粒夾入200ml酒精中浸泡5分鐘，濾干；

用75％的酒精清洗雙手，戴無菌手套，在超凈工作室中，用一只手抓住果柄及果實上部，另一只手持手術刀在果粒靠近果柄2/5處橫切一圈，深入果肉2mm，雙手掰開果實，看清胚著生部位，第二刀從中豎切一刀成兩半，用另一把刀的刀尖將胚珠挑入培養基中，每瓶播種胚珠20粒，每瓶胚珠播種完，將瓶口在酒精燈滅菌后蓋嚴，將2把手術刀在酒精燈上滅菌；

e、胚珠培養

在溫度為25℃、相對濕度45％、光強度2000lx、每天光照12h的條件下，將胚珠放入光照培養箱中進行離體培養60d；

f、切胚

準備胚萌發培養基：以1L Nitsch培養基為基本培養基，添加1.0mg IBA、0.2mg GA₃、1.0mg 6-BA、0.5g活性炭，各30毫升分裝于玻璃三角瓶中，高溫滅菌；

9月初，在超凈工作臺中，將胚珠用鑷子夾住，放在培養皿上，用手術刀從中間橫切，胚乳放入胚萌發培養基，每瓶播種10-12粒；每瓶播種完，將瓶口在酒精燈滅菌后蓋嚴，將鑷子、手術刀在酒精燈上滅菌，培養皿用無菌水沖洗；

g、胚萌發培養

在溫度為25℃、相對濕度45％、光強度2000lx、每天光照12h的條件下，將胚乳放入光照培養箱中進行離體培養10d-20d，至胚開始萌發，長出胚芽和細根；

h、成苗培養

將胚芽接入添加IBA濃度為0.1mg/L、活性炭濃度為1.0g/L、蔗糖濃度為30g/L的1/2MS培養基中，每瓶1芽，分別標記，在溫度為25℃、相對濕度45％、光強度2000lx、每天光照12h的條件下，在培養箱中培養30d；

三、擴繁及移栽：

i、擴繁

將長有8-10片葉的幼苗剪成每芽一段，接種到MS培養基中，分別標記，在組培室培養，15d-25d左右繼續擴繁；

j、練苗

第二年2月中旬，選擇根為4-5條、長3-5cm、葉子為4-5片，莖稈粗壯，基部無愈傷組織的壯苗，將三角瓶封口膜解開透氣鍛煉苗2-3天；

將基質加水潤濕后采用120℃滅菌30min，裝入紙杯體積的1/3；用無菌水沖洗幼苗根系后移栽到紙杯中，再加紙杯體積1/3的基質，上扣塑料杯，分別標記；在組培室進行煉苗，溫度控制在18-25℃、相對濕度60％-70％、光照強度1200lx，每周澆灌1000倍的多菌靈和稀釋30％的MS營養液各50mL；20天后，通過斜放的方式，逐步擴大塑料杯的通風口位置至杯口1/3處；

k、移栽

第二年3月下旬，幼苗連同底部穿洞透水的紙杯移栽到溫室中，分別標記，按照500ml/株灌足定根水并遮陰；15天后去除塑料杯和遮陰，20天為一周期灌水，同時補充10g尿素、10g磷酸鉀；每月葉面噴質量濃度為25％的多菌靈可濕性粉劑500倍液，質量濃度為25％的多菌靈可濕性粉劑500倍液中尿素的質量濃度為0.3％、百菌清水乳劑1000倍液交替使用預防病蟲害；每株留1蔓，副梢留2葉反復摘心，株高達到2m摘心；11月初停止生長，飽滿芽30個以上，徑粗0.8厘米以上；

l、高接

第二年5月末，采用綠枝嫁接技術，將溫室中雜交苗半木質化的芽高接到大樹上，分別標記，分別在6月、7月、8月，以20天為灌水周期，每月補加200g尿素+100g磷酸鉀/株，8月底結束，可提早打破童期；

四、鑒定

l、鑒定

第三年1月初，溫室升溫，按照溫室葡萄栽培管理技術要求進行管理；5月份對有果實的株系進行品質評價，篩選出優株；

m、高接

第三年5月中旬，采用綠枝嫁接技術，將優株半木質化的芽高接到大樹上，分別標記；

第四年重復l、鑒定和m、高接，篩選出有特殊玫瑰香味、紅色、早熟、粒重6-8g的優株；優選單株保留種條擴繁；

五、區試

第五年5月，將優選單株繁育的營養袋苗定植于苗圃；優株綠枝高接擴繁；優株評價；

第六年，優株區試并評價；擴繁；

第七年，優株區試并評價，示范推廣。