[發(fā)明專利]一種抗前列腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的組合物

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910263285.0
• 申請(qǐng)日: 2019-04-02
• 公開（公告）號(hào): CN110151778B
• 公開（公告）日: 2022-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 汪淑晶;楊德勇;韋安穩(wěn)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 大連醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K31/713
• 分類號(hào): A61K31/713;A61K31/585;A61P35/04
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責(zé)任公司 21212
• 代理人: 趙淑梅;李馨

本發(fā)明公開一種抗前列腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的組合物及其在制備治療前列腺癌轉(zhuǎn)移藥物方面的應(yīng)用；具體包括協(xié)同應(yīng)用雷公藤內(nèi)酯和ST6Gal I小干擾RNA(ST6Gal I?shRNA)的藥物組合方案，解決了臨床單獨(dú)應(yīng)用雷公藤內(nèi)酯存在毒性大以及單獨(dú)應(yīng)用ST6Gal I小干擾RNA(shST6Gal I)可能存在干擾不徹底或影響相似基因功能的問題。在明顯增加抗腫瘤轉(zhuǎn)移效果的同時(shí)，降低了雷公藤內(nèi)酯的毒性及對(duì)其他相似組織、基因功能的影響，將有助于該藥物后期研發(fā)，為抑制前列腺癌轉(zhuǎn)移提供新的治療思路。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及通過基因干擾技術(shù)抑制ST6Gal I基因表達(dá)并聯(lián)合中藥雷公藤內(nèi)酯制備的抗前列腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的組合物，及該組合物在制備治療具有阻斷前列腺癌轉(zhuǎn)移藥物方面的應(yīng)用。

背景技術(shù)

前列腺癌是男性生殖系統(tǒng)常見惡性腫瘤之一，臨床確診時(shí)大多已有轉(zhuǎn)移。目前針對(duì)轉(zhuǎn)移性前列腺癌的主要治療方法為雄激素剝奪療法，雖然經(jīng)雄激素剝奪治療后部分患者病情可有好轉(zhuǎn),但1年后多數(shù)前列腺癌會(huì)逐漸失去對(duì)雄激素剝奪治療的敏感性，而繼續(xù)轉(zhuǎn)移擴(kuò)散造成病人極大痛苦和最終死亡。因此，目前尚缺少有效的應(yīng)對(duì)前列腺癌轉(zhuǎn)移的治療手段。

雷公藤內(nèi)酯，又稱雷公藤甲素，是從中藥雷公藤中提取的活性成分，具有顯著的抗炎、免疫調(diào)節(jié)等活性，并可延長(zhǎng)器官移植患者的生存時(shí)間。近年來雷公藤內(nèi)酯抗腫瘤作用倍受關(guān)注，其可抑制多種腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，如卵巢癌、腎透明細(xì)胞癌、口腔癌及白血病。雷公藤內(nèi)酯亦可促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的凋亡，本課題組研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)前列腺癌細(xì)胞的遷移、侵襲亦有明顯的抑制作用，但臨床應(yīng)用雷公藤內(nèi)酯亦再存在不可忽視的劑量相關(guān)的肝腎、生殖毒性，因此如何降低其使用劑量又能達(dá)到抗腫瘤效果成為其臨床應(yīng)用的一大難題。

唾液酰基轉(zhuǎn)移酶ST6GalⅠ是催化合成唾液酸α2-6連接N-聚糖的關(guān)鍵酶，其所催化形成的α2-6唾液酸化是細(xì)胞表面受體重要的糖基化修飾之一。ST6GalⅠ可通過對(duì)腫瘤細(xì)胞膜表面受體(如整合素)的唾液酸化，影響該受體與細(xì)胞外基質(zhì)成分(如膠原蛋白)的黏附，誘導(dǎo)細(xì)胞釋放蛋白酶降解基底膜和基質(zhì)，促使腫瘤細(xì)胞發(fā)生血道或淋巴道轉(zhuǎn)移。本課題組研究發(fā)現(xiàn) ST6GalⅠ在前列腺癌中高表達(dá)，通過小干擾RNA(shRNA)抑制其表達(dá)可明顯抑制體外前列腺癌細(xì)胞發(fā)生遷移和侵襲(Wei A,Fan B,Zhao Y,et al.ST6Gal-I overexpressionfacilitates prostate cancer progression via the PI3K/Akt/GSK-3β/β-cateninsignaling pathway.Oncotarget.2016)。但單獨(dú)小劑量應(yīng)用小干擾RNA(shRNA)存在干擾不完全、不徹底的問題，大劑量應(yīng)用有可能抑制與特異性靶基因有一定序列相似性的基因的表達(dá)。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)協(xié)同應(yīng)用小干擾RNA(shRNA)和雷公藤內(nèi)酯，在明顯增加抗腫瘤轉(zhuǎn)移效果的同時(shí)，大幅降低了雷公藤內(nèi)酯的毒性及對(duì)其他相似組織、基因功能的影響，將為抑制前列腺癌轉(zhuǎn)移提供新的治療思路。本發(fā)明設(shè)計(jì)了如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供一種抗前列腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的組合物，該組合物由內(nèi)含唾液酰基轉(zhuǎn)移酶小干擾 RNA序列的重組質(zhì)粒與雷公藤內(nèi)酯組成。

對(duì)于上文所述的技術(shù)方案而言，具體的所述重組質(zhì)粒終濃度為3.0～5.0μg/mL，雷公藤內(nèi)酯濃度為20～30nM。優(yōu)選的濃度為重組質(zhì)粒終濃度為4.0μg/mL，雷公藤內(nèi)酯濃度為25nM。

對(duì)于上文所述的技術(shù)方案而言，具體的所述重組質(zhì)粒中ST6Gal I小干擾RNA的序列為：

正義鏈SEQ ID No.1:

5’-CACCCTGGGATGCTTGGTATCATTTCAAGAGAATAATCCGGATTCTGGTACTTTTT TG-3’；

反義鏈SEQ ID No.2: