[發明專利]LOC112268236基因的應用、檢測甲基化的核酸組合物及其試劑盒和檢測方法有效
| 申請號: | 201910253280.X | 申請日: | 2019-03-29 |
| 公開(公告)號: | CN109825589B | 公開(公告)日: | 2022-09-06 |
| 發明(設計)人: | 毛智囊;錢純亙;鄭剛;胡鹍輝 | 申請(專利權)人: | 深圳市亞輝龍生物科技股份有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/6886 | 分類號: | C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11;C12N9/12 |
| 代理公司: | 華進聯合專利商標代理有限公司 44224 | 代理人: | 潘霞;易皎鶴 |
| 地址: | 518116 廣東省深圳市龍*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | loc112268236 基因 應用 檢測 甲基化 核酸 組合 及其 試劑盒 方法 | ||
1.檢測LOC112268236基因啟動子的甲基化狀態或甲基化程度的試劑在制備檢測非小細胞肺癌的試劑、試劑盒或裝置中的應用,所述LOC112268236基因啟動子的序列如SEQ IDNo.1所示。
2.一種檢測甲基化的核酸組合物,其特征在于,包括檢測擴增引物對,所述檢測擴增引物對用于擴增LOC112268236基因啟動子,所述LOC112268236基因啟動子的序列如SEQ IDNo.1所示。
3.根據權利要求2所述的檢測甲基化的核酸組合物,其特征在于,所述檢測擴增引物對的序列如SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。
4.根據權利要求2所述的檢測甲基化的核酸組合物,其特征在于,還包括內參擴增引物對,所述內參擴增引物對用于擴增甲基化的內參基因,所述內參基因選自U6基因、GAPDH基因及actin基因中的至少一種。
5.根據權利要求4所述的檢測甲基化的核酸組合物,其特征在于,所述內參擴增引物對的序列如SEQ ID No.4和SEQ ID No.5所示。
6.一種檢測甲基化的試劑盒,其特征在于,包括權利要求2~5任一項所述的檢測甲基化的核酸組合物。
7.根據權利要求6所述檢測甲基化的試劑盒,其特征在于,還包括DNA聚合酶,所述DNA聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID No.6所示。
8.根據權利要求6所述的檢測甲基化的試劑盒,其特征在于,還包括DNA提取試劑、亞硫酸鹽轉化試劑、dNTPs、PCR反應液、Mg2+試劑、熒光染料、陽性對照品、陰性對照品中的至少一種。
9.根據權利要求8所述的檢測甲基化的試劑盒,其特征在于,所述陽性對照品含有序列如SEQ ID No.1所示的核酸;
及/或,所述陰性對照品含有序列如SEQ ID No.7所示的核酸。
10.一種非診斷目的的甲基化的檢測方法,其特征在于,包括如下步驟:
提取待測樣本中的核酸;
對所述核酸進行亞硫酸鹽處理;及
采用權利要求6~9任一項所述的檢測甲基化試劑盒對亞硫酸鹽處理后的所述核酸進行熒光定量PCR擴增反應,根據反應結果進行檢測分析。
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