[發明專利]一種抗人白介素-1受體輔助蛋白的單鏈抗體及其應用

有效

• 申請號: 201910244032.9
• 申請日: 2019-03-28
• 公開（公告）號: CN110041428B
• 公開（公告）日: 2022-01-28
• 發明（設計）人: 曾凡力;段世鑫;賈艷榮;曾培;郝志敏;董金皋
• 申請（專利權）人: 河北農業大學
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;A61K39/395;A61P29/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 李冉

本發明公開了一種抗人白介素?1受體輔助蛋白(IL1RAP)的單鏈抗體，包括重鏈可變區和輕鏈可變區；重鏈可變區氨基酸序列如SEQ ID NO:1自N末端3?120位所示；輕鏈可變區氨基酸序列如SEQ ID NO:1自N末端127?238位所示。本發明抗人白介素?1受體輔助蛋白的單鏈抗體能夠特異性識別并結合IL1RAP，其在炎癥反應及慢性/急性髓性白血病治療，抗淀粉樣凝塊形成，阿爾茲海默癥的惡化療法以及其他腫瘤治療方面具有潛在的應用價值。

技術領域

本發明涉及生物技術醫藥領域，更具體的說是涉及一種能夠特異性識別并結合人白介素-1受體輔助蛋白IL1RAP的單鏈抗體及其應用。

背景技術

細胞因子白細胞介素1(IL-1)對體內的免疫、感染和組織損傷產生多種生理反應，其強有力的防御活動需要嚴格控制，以避免不必要的病理紊亂。IL-1家族共有11個成員，其中有7個都是促炎性因子，可介導多種免疫反應。

白細胞介素-1受體輔助蛋白(IL1RAP/IL1R3/IL-1RAcP)是一種參與多種信號傳導途徑的共受體。通過IL-1傳遞信號需要形成一個涉及IL-1、白細胞介素-1受體1型(IL1R1)和IL1RAP的細胞表面受體復合物，缺乏IL1RAP可完全消除細胞對IL-1的反應；即促炎性因子作用于細胞時首先與細胞表面各自受體結合形成受體復合物，該復合物再與IL1RAP結合形成異源三聚體結構，從而具備了向細胞內傳遞信號的能力。因此可認為，開發針對IL1RAP的抗體從而特異性結合IL1RAP蛋白，使帶有促炎性因子的受體復合物無法與IL1RAP結合，使細胞無法接收到促炎性因子的信號，細胞則不發生炎癥反應。

有研究表明，IL1RAP在候選CML干細胞的細胞表面表達，但在正常造血干細胞(hscs)上不表達。在急性髓性細胞白血病和骨髓增生異常綜合征中的原始細胞上，IL1RAP的表達量也有所升高。此外，IL1RAP抗體可通過抗體依賴性細胞毒性(ADCC)誘導對原始CML和急性髓細胞白血病細胞的殺傷。還有研究表明，IL-1刺激選擇性地誘導原始CML細胞的信號傳導和表達，這種效應可能被IL1RAP抗體抑制?？傊?，上述結果表明，以IL1RAP為靶點開發抗體藥物殺死白血病干細胞前景可觀。

因此，開發針對IL1RAP的單鏈抗體，從而阻斷IL1RAP與IL-1和受體復合物的結合，為依賴IL-1的慢性炎癥或自身免疫病的治療開辟新的可能性。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種抗人白介素-1受體輔助蛋白的單鏈抗體，可特異性識別并結合人白介素-1受體輔助蛋白。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種抗人白介素-1受體輔助蛋白的單鏈抗體，包括重鏈可變區和輕鏈可變區；

重鏈可變區氨基酸序列如SEQ ID NO:1自N末端3-120位所示；

輕鏈可變區氨基酸序列如SEQ ID NO:1自N末端127-238位所示。

優選地，上述抗人白介素-1受體輔助蛋白的單鏈抗體氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

一種基因工程抗體，與上述抗人白介素-1受體輔助蛋白的單鏈抗體具有80％以上的同源序列，并且與人白介素-1受體輔助蛋白特異性結合。

優選地，上述基因工程抗體包含

(1)Fab片段、F(ab)’片段、Fd片段、Fv片段或Fc片段中的至少一種；

或(2)Fab片段、F(ab)’片段、Fd片段、Fv片段或Fc片段中的至少一種與其它蛋白或肽鏈形成的衍生物。

優選地，上述基因工程抗體的重鏈CDR 3區序列為ARSGRIAVADY，輕鏈CDR3區序列為MQGTHWPGT。