[發明專利]高效降解菌核凈的單胞屬菌酶劑的制備方法及應用在審
| 申請號: | 201910244010.2 | 申請日: | 2019-03-28 |
| 公開(公告)號: | CN109971679A | 公開(公告)日: | 2019-07-05 |
| 發明(設計)人: | 吳小毛;張承;李姣紅;龍友華;李榮玉;王秋萍;代園鳳;黃文源 | 申請(專利權)人: | 貴州大學 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;C12N9/00;C02F3/34;B09C1/10;C12R1/01;C02F101/38;C02F101/34 |
| 代理公司: | 貴陽中新專利商標事務所 52100 | 代理人: | 李余江;程新敏 |
| 地址: | 550025 貴州省貴*** | 國省代碼: | 貴州;52 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 單胞 高效降解 降解酶 菌核凈 制備 菌酶 植物體 應用 超聲破碎 環境友好 大白菜 菌懸液 速效性 異菌脲 菌酮 擴繁 生菜 馬鈴薯 菌種 番茄 韭菜 黃瓜 辣椒 水體 油菜 煙草 土壤 | ||
1.一種高效降解菌核凈的單胞屬菌酶劑的制備方法,其特征在于:其以單胞屬菌Brevundimonas naejangsanensis為菌種,經菌懸液擴繁和降解酶劑超聲破碎提取制備而得單胞屬菌降解酶劑。
2.根據權利要求1所述的高效降解菌核凈的單胞屬菌酶劑的制備方法,其特征在于:包括如下步驟:
1)菌懸液制備:無菌條件下加入無菌磷酸鹽緩沖液于菌種培養皿中平行振蕩,并用接種環輕輕刮落培養基表面的菌落,即成粗制菌懸液,將其轉移到液體發酵培養基中在pH為7.5~8,30~35℃,150~200rpm條件下培養48~56h;將取出的發酵液立即在8000~10000r/min下離心10~15min,收集濕菌體,并用無菌磷酸鹽緩沖液沖洗3次;然后將無菌磷酸鹽緩沖液與濕菌體混勻,控制菌體數量為≥6×1010cfu/mL;制得的菌懸液3~4℃保存備用。
2)游離酶提取:對步驟1)制得的菌懸液進行超聲破碎提取游離酶,超聲破碎時間10~15min,功率320W,每10s一個周期;破碎液在8000~10000r/min,3~4℃下離心10~15min,得上清液即制得游離酶;上清液游離酶含量控制在大于等于3.00mg/mL。
3.根據權利要求2所述的的高效降解菌核凈的單胞屬菌酶劑的制備方法,其特征在于:所述液體發酵培養基由以下原料按比例制得:麥芽糖7g/L、酵母膏6g/L、NaCl 3g/L。
4.一種如權利要求1或2的方法制備的高效降解菌核凈的單胞屬菌酶劑的應用,其特征在于:所述高效降解菌核凈的單胞屬菌酶劑應用于高效降解包括油菜、大白菜、紫菜苔、生菜、韭菜、黃瓜、番茄、辣椒、馬鈴薯、煙草在內的植物體中以及土壤和水體中的菌核凈,或者應用于高效降解植物、土壤和水體中的烯菌酮和異菌脲。
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