[發明專利]一種賽州黃檀HPLC標準指紋圖譜及其構建方法和應用

在審

• 申請號: 201910243613.0
• 申請日: 2019-03-28
• 公開（公告）號: CN110031574A
• 公開（公告）日: 2019-07-19
• 發明（設計）人: 魏建華;吳劍光;林隆強;李冠斯;劉玉莉
• 申請（專利權）人: 汕頭出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74;G01N30/86
• 代理公司: 上海旭誠知識產權代理有限公司 31220
• 代理人: 鄭立

1.一種賽州黃檀HPLC標準指紋圖譜，其特征在于，包括13個特征峰，以保留時間最長的所述特征峰為參照峰，13個所述特征峰的相對保留時間分別為：0.367，0.524，0.545，0.560，0.657，0.668，0.692，0.704，0.735，0.756，0.803，0.918，1.000，RSD％<0.3％；其中相對保留時間為0.803的所述特征峰的峰面積最大。

2.如權利要求1所述的賽州黃檀HPLC標準指紋圖譜，其特征在于，13個所述特征峰的相對峰面積分別為：0.5193，0.6501，0.1654，0.3058，1.3638，1.1233，1.4133，0.2776，0.1861，0.7472，2.9318，0.5195，1.000，RSD<1.0。

3.一種如權利要求1所述的賽州黃檀HPLC標準指紋圖譜的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一、供試品溶液的制備：稱取賽州黃檀心材部分木屑，置于50mL離心管中，加入甲醇、高純水，震搖，超聲提取，濾紙過濾，微孔濾膜過濾，得到所述供試品溶液；

步驟二、將步驟一制得的所述供試品溶液進行HPLC檢測，以水為流動相A，乙腈為流動相B，流速為1.0mL/min，檢測波長為290nm，柱溫為30℃，流動相采用梯度洗脫方式：從0～20min，所述流動相B的體積百分含量由8％提高至23％，所述流動相A的體積百分含量由92％降低至77％；從20～33min,所述流動相B的體積百分含量為23％，所述流動相A的體積百分含量為77％；從33～43min，所述流動相B的體積百分含量由23％提高至30％，所述流動相A的體積百分含量由77％降低至70％；從43～53min,所述流動相B的體積百分含量30％，所述流動相A的體積百分含量為70％；從53～69min，所述流動相B的體積百分含量由30％提高至38％，所述流動相A的體積百分含量由70％降低至62％；從69～76min，所述流動相B的體積百分含量38％，所述流動相A的體積百分含量為62％；從76～91min，所述流動相B的體積百分含量由38％提高至49％，所述流動相A的體積百分含量由62％降低至51％；從91～92min，所述流動相B的體積百分含量49％，所述流動相A的體積百分含量為51％；從92～95min，所述流動相B的體積百分含量由49％降低至8％，所述流動相A的體積百分含量由51％提高至92％；從95～103min，所述流動相B的體積百分含量8％，所述流動相A的體積百分含量為92％。

4.如權利要求3所述的賽州黃檀HPLC標準指紋圖譜的構建方法，其特征在于，所述賽州黃檀心材部分木屑的稱取量為0.2g，所述甲醇的加入量為5mL，所述高純水的加入量為5mL，所述震搖的時間為5min，所述微孔濾膜的孔徑為0.2μm。

5.如權利要求3所述的構建方法，其特征在于，還包括步驟三、分析比較多批來源不同的賽州黃檀的HPLC檢測結果，得到由其共有特征峰構成的所述賽州黃檀HPLC標準指紋圖譜。

6.如權利要求5所述的賽州黃檀HPLC標準指紋圖譜的構建方法，其特征在于，所述步驟三具體為：將7批來源不同的所述賽州黃檀的HPLC檢測結果導入國家藥典委員會頒布的“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(2012版)”，選取時間窗寬度為0.2min，以中位數生成對照譜圖，經過校正后自動匹配，生成賽州黃檀指紋圖譜共有模式，并計算所述7批來源不同的賽州黃檀的HPLC檢測結果與所述賽州黃檀指紋圖譜共有模式的相似度，使得所述相似度在0.8以上，得到由其共有特征峰構成的所述賽州黃檀HPLC標準指紋圖譜。