[發明專利]一種增加酶催化制備α-酮戊二酸轉化率的方法有效
| 申請號： | 201910241528.0 | 申請日： | 2019-03-28 |
| 公開（公告）號： | CN109988786B | 公開（公告）日： | 2022-04-05 |
| 發明（設計）人： | 楊明貴;熊傳波;郭小雷;楊軍;張楚揚 | 申請（專利權）人： | 新泰市佳禾生物科技有限公司;汕頭市佳禾生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12P7/50 | 分類號： | C12P7/50 |
| 代理公司： | 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業) 37240 | 代理人： | 高強 |
| 地址： | 271200 *** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 增加 催化 制備 酮戊二酸 轉化 方法 | ||
1.一種增加酶催化制備α-酮戊二酸轉化率的方法，其特征在于，包括以下步驟：
在酶催化L-谷氨酸或L-谷氨酸鹽制備α-酮戊二酸的過程中，監測丁二酸的含量，通過流加過氧化氫酶，控制丁二酸的含量為0.1-1.0g/L；
所述酶催化L-谷氨酸或L-谷氨酸鹽制備α-酮戊二酸具體為：
以L-谷氨酸或L-谷氨酸鹽為底物，加入一水合硫酸錳和過氧化氫酶，調節pH至6.5，再加入L-谷氨酸氧化酶，轉化反應14-20h；
所述底物采用分批加入的形式；所述底物的初始濃度為120-130g/L，待反應至底物含量低于50g/L后，再加入底物至底物濃度為80-100 g/L，繼續反應。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，每1L的反應體系中，一水合硫酸錳的加入量為0.507g。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，每1L的反應體系中，過氧化氫酶的酶活力為30-60W單位； L-谷氨酸氧化酶生物酶活力為4000-8000U。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述轉化反應的條件為：控制攪拌轉速400rpm，通氣量≥0.4vvm，罐壓保持0.05MPa。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，采用HPLC法監測丁二酸的含量。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，HPLC法監測丁二酸的含量所采用的色譜條件為：色譜柱為月旭Xtimate Sugar-H，5μm，7.8*300mm；流動相為5mM硫酸，紫外檢測器，波長為210nm，流速為0.2-1.0ml/min，柱溫25-40℃。
7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，流加的過氧化氫酶的酶活力為5-40W單位/ml。
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