[發明專利]干擾Mroh7基因表達的siRNA及其應用、干擾方法與藥物

有效

• 申請號: 201910236237.2
• 申請日: 2019-03-26
• 公開（公告）號: CN109880828B
• 公開（公告）日: 2021-02-05
• 發明（設計）人: 王棋文;白俊杰;張春艷;王改平;葉丙雨
• 申請（專利權）人: 河南師范大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/7115;A61P43/00
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李永宏

本申請提出了干擾Mroh7基因表達的siRNA及其應用、干擾方法與藥物，屬于分子生物技術與基因工程領域。本申請提出干擾Mroh7基因表達的siRNA及其應用、干擾方法與藥物，通過在細胞中轉染siRNA，可以調控Mroh7基因表達，進一步影響細胞活力，并調控細胞增殖和凋亡相關基因的正常表達；故此將干擾Mroh7基因表達的siRNA應用到制備提高細胞活力、調控細胞分裂增殖和凋亡等過程藥物中，具有較高的實際應用的價值。

技術領域

本申請涉及到分子生物技術和基因工程領域，即涉及干擾Mroh7基因表達的siRNA及其應用、干擾方法與藥物。

背景技術

肝臟是人體中各種物質代謝、能量轉換及供應的樞紐和主導器官，是機體內多種重要信息調控分子的“集散地”。肝臟也是人體具備極強再生能力的器官，對其修復再生的相關基因的研究在對肝細胞增值、疾病的治療及藥物的研發中都具有十分重要的意義。利用RNAi技術向哺乳動物細胞中特異性的導入siRNA片段,可以降低靶基因的正常表達，進而降低靶蛋白的表達，從而達到高效特異性的基因治療效果。

Mroh7基因全長為45290bp，含25個外顯子，其外顯子分別位于該基因的1-91，185-262，5363-5397，6774-7952，12952-13016，15749-5832，17001-17080，17312-17441，19191-19286，19911-20015，20144-20279，23478-23590，24309-24485，24859-25013，27321-27459，27674-27864，32499-32636，33495-33609，35509-35649，36259-36438，36889-37044，37699-37821，42166-42268，44303-44365，44885-45290bp處，其mRNA全長為4238bp，共編碼1123個氨基酸。其保守結構域是pfam05109(Herpes virus major outer envelopeglycoprotein(BLLF1))，該家族由BLLF1病毒晚期糖蛋白組成，也稱為gp350/220。它是皰疹病毒的病毒包膜中表達最豐富的糖蛋白，并且是負責刺激體內中和抗體產生的主要抗原。然而，在大鼠體內，Mroh7的功能不明確。

發明內容

本申請的目的在于提出了干擾Mroh7基因表達的siRNA及其應用、干擾方法與藥物，本申請提出干擾Mroh7基因表達的siRNA，通過脂質體轉染的辦法，將影響Mroh7基因表達的siRNA轉入細胞內，能干擾Mroh7基因的正常表達，調控細胞活躍度和細胞分裂增殖能力等。

Mroh7基因的保守結構域(Conserved domains)是pfam05109(Herpes virusmajor outer envelope glycoprotein(BLLF1))，該家族由BLLF1病毒晚期糖蛋白組成，也稱為gp350/220，是皰疹病毒的病毒包膜中表達最為豐富的一種糖蛋白，并且是負責刺激體內中和抗體產生的主要抗原；因此研究Mroh7基因也有助于研究皰疹病毒和對皰疹病毒引起的疾病的治療。

第1方面，本申請的實施例提出了干擾Mroh7基因表達的siRNA，干擾Mroh7基因表達的siRNA包括siRNA1、siRNA2和siRNA3至少一種；siRNA1的堿基序列如SEQ ID NO.1所示，siRNA2的堿基序列如SEQ ID NO.2所示，siRNA3的堿基序列如SEQ ID NO.3所示。

在前述實施方式中，siRNA1的靶序列為GTCAATGTGACTTCCAACA；siRNA1的堿基序列如SEQ ID NO.1所示，SEQ ID NO.1：5’GUCAAUGUGACUUCCAACA dTdT3’。陰性對照序列為：3’dTdT CAGUUACACUGAAGGUUGU5’。