[發明專利]一種XAGE-1b九肽及其應用

在審

• 申請號: 201910233750.6
• 申請日: 2019-03-26
• 公開（公告）號: CN110016073A
• 公開（公告）日: 2019-07-16
• 發明（設計）人: 張蓓
• 申請（專利權）人: 廣州美薩生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C12N5/0783;C12N5/0784;A61K39/00;A61P35/00;G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 許飛

本發明公開了一種XAGE?1b九肽及其應用。XAGE?1b短肽的序列為GSRQKKIRI。本發明的XAGE?1b抗原肽誘導建立的CTL對睪丸細胞不會產生免疫應答，只殺傷腫瘤細胞。誘導得到的CTL克隆具有良好的腫瘤細胞特異性殺傷效應。同時在建立CTL過程中，發明人發現篩選出的XAGE?1b抗原肽具有與DC細胞上HLA適當的親和力并能有效地刺激、誘導產生特異性CTLs，說明其具備良好的多肽疫苗及DC疫苗的潛力。通過克隆XAGE?1b抗原肽特異性TCR基因，構建病毒載體，轉導外周循環CD8+T細胞，獲得TCR基因修飾的T細胞(TCR?T)克隆，同樣具有與親代CTL相似的腫瘤細胞特異性殺傷效應，提示其具有良好的臨床轉化及實際應用前景。

技術領域

本發明腫瘤相關抗原肽及其應用，特別涉及腫瘤相關抗原XAGE-1b短肽及其應用。

背景技術

眾所周知，T細胞過繼治療腫瘤是目前最令人矚目的技術，尤其是受體工程化T細胞(TCR-T)的應用正成為振奮人心的癌癥治療方法，同樣對病毒感染及自身免疫性疾病具有廣泛的應用前景。

人體免疫監視系統在抵抗腫瘤生長過程中的重要作用，免疫監視系統通過協調各類免疫細胞得以實現抑制腫瘤生長的目的，其中細胞毒性T細胞(cytotoxic Tlymphocyte，CTLs)扮演極其重要的角色，是最關鍵的殺傷效應細胞。腫瘤抗原特異性CD8⁺T細胞可以特異性識別并直接殺傷腫瘤細胞而不對正常細胞造成傷害。T細胞治療因此成為最理想的腫瘤治療策略。美國NIH曾預言，細胞治療可能會成為“能夠徹底治愈腫瘤的唯一手段”。因此，獲得能夠特異性識別、殺傷腫瘤細胞的CTL是治療腫瘤的核心。

利用腫瘤相關抗原(Tumor-associated antigen，TAA)短肽誘導建立腫瘤抗原肽特異性CTL，即可獲得具有特異性殺傷腫瘤細胞的CTL克隆，并為下一步開發具有臨床實際應用價值的T細胞過繼治療腫瘤奠定了重要基礎，同時在此基礎之上，還可以獲得如下成果：

1)這些經過鑒定篩選出的腫瘤相關抗原肽氨基酸序列，將可被用于構建有效的抗腫瘤肽疫苗、DC疫苗；

2)通過分子克隆技術可以使發明人獲得明確的具有特異性識別腫瘤抗原的TCR編碼基因，用于TCR基因修飾T細胞的建立；

3)通過合成與短肽特異性結合的熒光探針，可開發具有自主知識產權的分子探針試劑盒，用于非小細胞肺癌的早期診斷與治療。

目前，T細胞受體(T cell receptor，TCR)基因修飾T細胞(TCR-T)，如同嵌合抗原受體(chimeric antigen receptor，CAR)修飾T細胞(CAR-T)技術一樣倍受關注。CAR-T應用于血液腫瘤治療已取得令人矚目的療效。CAR由單鏈Fv融合CD3信號單元，其功能活性依賴于信號單元的敏感性，信號單元由共刺激分子和(或)細胞因子組成。然而，有研究顯示，表達CAR的T細胞對多肽的敏感性不如表達αβTCR異源二聚體的T細胞。TCR-T即通過TCR基因修飾T細胞技術，將已獲得的具有特異性識別腫瘤抗原多肽的TCR編碼基因轉導循環CD8⁺T細胞，通過這一方法可在極短的時間內獲得大量的穩定高表達特異性TCR的、具有與親代CTL同樣的腫瘤特異性識別與殺傷效應的基因修飾T細胞，從而滿足實際臨床應用所需。發明人從2005年就開始從事腫瘤相關抗原肽特異性CTL的誘導建立，TCR相關研究(Int JHematol.2011，93:176–185)及TCR基因修飾T細胞的研究，分別成功將腫瘤相關抗原WT1及Aurora kinase A特異性TCR轉導循環CD8+T細胞(Blood，2011，118:1495-1503；Blood，2012，119:368-376)，獲得TCR-T克隆，經體外、體內鑒定，證實了其抗肺癌或白血病細胞的有效性。

TCR基因修飾T細胞技術越來越顯現出它在腫瘤免疫治療中的重要價值及美好前景，而生成TCR-T的關鍵前提是獲得具有特異識別腫瘤抗原的TCR，通過體外誘導建立腫瘤相關抗原肽特異性CTL是實現這一目標的一個重要途徑。