[發明專利]食品和飼料中驢源性成分的實時熒光PCR檢測方法

有效

• 申請號: 201910231995.5
• 申請日: 2019-03-26
• 公開（公告）號: CN109943625B
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發明（設計）人: 王強;許鎮堅;趙麗娜;王贏;潘良文
• 申請（專利權）人: 上海海關動植物與食品檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: C12Q1/6851
• 分類號: C12Q1/6851;C12Q1/6888
• 代理公司: 上海華工專利事務所(普通合伙) 31104
• 代理人: 趙孟琴;繆利明

1.一種食品和飼料中驢源性成分的實時熒光PCR檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

第一步，以待測樣品的DNA為模板，進行熒光定量PCR擴增，獲得PCR擴增產物；

第二步，檢測擴增產物的熒光信號；

第三步，以檢測結果的Ct值判定樣品中是否含有驢源性成分以及定量檢測樣品中的驢源性成分的含量；

其中，用于PCR擴增的反應體系中含有擴增驢源性成分的特異性引物對和檢測驢源性成分的特異性探針，所述擴增驢源性成分的特異性引物對的序列如SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2所示，所述檢測驢源性成分的特異性探針的序列如SEQ ID NO.3所示。

2.如權利要求1所述的實時熒光PCR檢測方法，其特征在于，所述PCR擴增的條件如下：

反應體系為25μL：PCR酶混合物 12.5μL，引物為10μM，各1μL，探針為10μM， 0.5μL，DNA模板5μL，PCR級水5μL；

PCR反應條件：95℃ 10min；95℃ 15s，60℃ 60s；共45個循環。

3.一種驢源性成分的檢測試劑盒，其特征在于，含有以下試劑：

（a）擴增驢源性成分的特異性引物對；

（b）檢測 驢源性成分的特異性探針；

其中，所述擴增驢源性成分的特異性引物對的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，所述檢測驢源性成分的特異性探針的序列如SEQ ID NO.3所示。

4.根據權利要求3所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述檢測試劑盒還包括：

（c）標準參照物。

5.一種如權利要求3或4所述的檢測試劑盒的應用，其特征在于，所述檢測試劑盒用于定性或定量檢測食品或飼料中的驢源性成分。

6.一種檢測驢源性成分的特異性引物對和探針，其特征在于，所述特異性引物對的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，所述特異性探針的序列如SEQ ID NO.3所示。