[發明專利]一種白芨無菌苗快速誘導叢生芽及生根快繁的方法

在審

• 申請號: 201910231777.1
• 申請日: 2019-03-26
• 公開（公告）號: CN109964815A
• 公開（公告）日: 2019-07-05
• 發明（設計）人: 秦紀洪
• 申請（專利權）人: 成都大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 成都方圓聿聯專利代理事務所(普通合伙) 51241
• 代理人: 李鵬

本發明屬于植物培育技術領域，具體涉及一種白芨無菌苗快速誘導叢生芽及生根快繁的方法，果莢置乙醇浸泡消毒后，縱向剖開后撒播到配制好的發芽培養基上；發芽后依次經暗培養、正常培養，將得到白芨無菌苗移入叢生芽誘導及生根一體化培養基中得到大量生根白芨苗，培育一段時間后移到室內進行馴化，再移栽到生長基質中保濕培養，最后移栽到大田。本發明縮短了白芨組培苗擴繁時間至2～3個月，將白芨苗誘導叢生芽以及生根融合到一步完成，簡化了操作步驟，并且穩定了白芨苗的性狀表現，保證了白芨組培苗中各藥性成分的穩定，從源頭保證了藥材的質量。

技術領域

本發明屬于植物培育技術領域，具體涉及一種白芨無菌苗快速誘導叢生芽及生根快繁的方法。

背景技術

白芨(Bletilla striata)，為蘭科白芨屬多年生草本，亦稱連及草、白及、甘根、紫蘭等，廣泛分布于長江流域各省，日本、朝鮮也有分布。白芨鱗莖可入藥，為我國傳統中藥，具有止血補肺、生肌止痛之效，常用來治療吐血、肺病、慢性胃潰瘍等。白芨花色為白色、黃色或紅紫色，也是一種很好的觀賞植物。另外，由于白芨中含量較高的白芨膠可替代阿拉伯膠等，作為混懸劑及乳化劑，廣泛用于食品及化工領域。近年來，隨著白芨市場需求量的不斷攀升，野生白芨遭到過度采挖，導致其野生資源急劇減少，瀕臨滅絕，已被列為《國家重點保護野生植物(第二批)》II級、《瀕危動植物種國際貿易公約(CITES)》附錄II級(管制國際貿易的物種)保護物種。

白芨目前通過種子無菌萌發快繁實現產業化育苗，因為種子無菌萌發被認為是非常有效的途徑，但是這些方法周期較長、步驟多，這種方法培養的無菌苗只有一個芽，未進行叢生芽的誘導。自然狀況下，白芨經過一次倒苗另外萌發2～3個側芽實現假鱗莖的增殖增重，因此白芨瓶苗移栽到苗圃或移栽之后，經過冬天倒苗，春天發芽形成2～3個側芽，實現白芨產量增加。因此，如果沒有誘導側芽，則形成側芽要至少多消耗一年時間。

目前公開的文獻中，公開號CN 105123529 A白芨快繁和高效栽培方法，該方法種子萌芽時間周期長，該現有發明的白芨種子萌芽時間有29～31d；另外誘導原球莖時間周期長，該現有發明的白芨苗誘導原球莖的時間為90天，不利于產業化發展。

發明CN 109169275 A一種紫花三叉白芨組培快繁培養基及方法，操作步驟復雜繁瑣，該現有技術從誘導白芨種子發芽到誘導白芨苗生根，一共涉及到四個不同的培養基配方，這不僅增加了操作轉接步驟，使得白芨苗的生長過程中更容易受到污染，而且還增加了大量的物資成本以及勞動力成本，同樣擴繁時間周期長，該現有發明完成整個擴繁時間周期為5～6個月，時間周期過長不僅增加了投入成本，同時增加了市場成本，不利于產業化發展。

發明內容

本發明主要實現了白芨苗快速誘導叢生芽以及將白芨苗誘導叢生芽和生根兩步融合到一步實現，解決了目前白芨苗組織培養誘導叢生芽速率慢、增殖率低、擴繁周期長、生根率低、操作步驟繁瑣等一系列問題。在白芨種子無菌萌發基礎上，控制性誘導白芨叢生芽，促進假鱗莖增大，形成有3～5個側芽的瓶苗植株，煉苗后在3個月左右即形成相當于原來兩年時間形成的帶2～3個側芽的白芨多芽種苗，實現了快速、高增殖率、增殖生根一體化、穩定地增殖白芨苗，保障了中藥材市場上白芨的供應量和藥材質量。

具體的技術方案為：

一種白芨無菌苗快速誘導叢生芽及生根快繁的方法，包括以下步驟：

(1)采集野生成熟前黃色的白芨蒴果，密封保存于4℃環境下，接種前將白芨蒴果果莢在純水溶液中刷洗去灰土，選擇未破裂的果莢置超凈工作臺上用75％乙醇浸泡40s～60s，用超純水沖洗2次，再用消毒劑浸泡15min，用超純水沖洗3次，將其用無菌紙吸干水分后，用手術刀切去果實頂部，再從果實中部縱向剖開，將種子均勻的撒播到配制好的發芽培養基上；

步驟(1)中所述的消毒劑為0.1％升汞；所述的種子發芽培養基的配方為：1/3 MS+ZT 0.05～0.10mg/L+NAA 0.8～1.2mg/L+蔗糖3％+瓊脂0.5％，pH＝5.8～6.0。