[發明專利]一種可用于輔助氯吡格雷精準用藥的PRKCZ基因SNP標志物

在審

• 申請號: 201910225720.0
• 申請日: 2019-03-25
• 公開（公告）號: CN111733224A
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發明（設計）人: 崔一民;向倩;劉志艷;母光妍;徐為人;李川
• 申請（專利權）人: 北京大學第一醫院;天津藥物研究院有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
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本發明公開了一種與抗血小板藥物氯吡格雷治療ACS精準用藥相關的SNP標志物及其應用，以及檢測該標志物的特異性擴增引物。所述SNP標志物為PRKCZ基因上的rs62641632,能夠很好區分氯吡格雷低效和氯吡格雷有效的CAS的人群，幫助進行氯吡格雷的精準用藥，明確了SNP標志物及其擴增引物用于制備相關的檢測試劑盒的用途。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域。更具體地，涉及一種用于預測抗血小板藥物氯吡格雷治療ACS劑量和療效、副作用相關的PRKCZ基因SNP標志物及其應用。

背景技術

急性冠狀動脈綜合征(ACS)是以冠狀動脈粥樣硬化斑塊破裂侵襲，繼發完全或不完全閉塞性血栓形成為病理基礎的一組臨床綜合征，包括急性ST段抬高性心肌梗死、急性非ST段抬高性心肌梗死和不穩定型心絞痛(UA)。ACS是一種常見的嚴重的心血管疾病，是冠心病的一種嚴重類型，可導致心律失常、心力衰竭、甚至猝死，嚴重影響患者的生活質量和壽命。用于解除狹窄冠狀動脈阻塞的經皮冠狀動脈介入治療(percutaneous coronaryintervention，PCI)是治療心絞痛或急性冠狀動脈事件廣泛使用的技術，是最常見的心肌血運重建形式。PCI手術平均每年增加30-40％，2016年中國PCI手術總數為666,495。PCI主要缺點之一是再狹窄的發生。據報道根據患者個體特征及手術采用技術等因素，再狹窄發病率約為5-25％。PCI另一個缺點是不能阻止冠狀動脈粥樣硬化的進展，PCI術后癥狀性疾病進展的患者中再次血運重建比率高達50％。由于再狹窄和疾病進展導致的再次血運重建已經給患者和社會帶來了重大的臨床和經濟負擔。

氯吡格雷是法國賽諾菲圣德拉堡制藥公司于1986年研究開發成功的血小板聚集抑制劑，已經成為用于治療急性冠狀動脈綜合征(ACS)的最普遍和最重要的藥物之一，是PCI后需要長期服用的基礎藥物。但是多年代臨床使用發現氯吡格雷在臨床應用中個體差異大和耐受現象，已經明確的部分原因是由于氯吡格雷是一個前體藥物，在人體內需要經過2步代謝才能成為活性形式，第一步為CYP2C19的代謝，約10-20％的人群存在CYP2C19的基因突變，導致代謝困難，使氯吡格雷在體內不能產生活性形式的產物，從而降低療效。除了代謝多態性的原因，還有一部分人對氯吡格雷相同劑量的活性響應差異較大，導致同劑量下有的人可能存在出血現象，而有的人還沒有療效。因此，還需要CYP2C19以外的生物標志物來預測氯吡格雷治療ACS的療效。

發明內容

針對現有的基于CYP2C19多態性的氯吡格雷預測個體差異的方法不能解決的問題，本發明的目的是提供一種可用于預測抗血小板藥物氯吡格雷治療ACS相關的PRKCZ基因SNP位點，可用于抗血小板藥物氯吡格雷治療ACS患者的臨床用藥指導，預防藥物抵抗，增強治療效果，減少不良反應。

本發明另一目的是提供上述標志物的特異性擴增引物。

本發明的再一目的是提供上述標志物及其特異性擴增引物在制備抗血小板藥物氯吡格雷防治ACS的輔助診斷試劑盒中的應用。

本發明上述目的通過以下技術方案實現：

具體是通過分離和研究服用抗血小板藥物氯吡格雷的ACS患者的外周血DNA中的SNP，尋找與氯吡格雷反應性差異高度相關的位點，并可用于研制的氯吡格雷防治ACS時長期用藥時提高用藥劑量精確性的相關試劑盒，為ACS的治療提供支撐。

所述特異性擴增引物為rs62641632特異性擴增引物的上游引物和下游引物序列，分別如SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2所示。

制備了一種能用于氯吡格雷防治ACS的輔助診斷的試劑盒，包含測定受試者血DNA標本中上述SNP的特異性引物、特異性熒光探針對和其他檢測試劑。

本發明具有以下有益效果：