[發明專利]一種二酰甘油酰基轉移酶1及其在生產甘油三酯中的應用

有效

• 申請號: 201910216803.3
• 申請日: 2019-03-21
• 公開（公告）號: CN109837256B
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發明（設計）人: 陳海琴;陳衛;唐鑫;曹珺;趙建新;陳永泉;張灝
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/54;C12N15/63;C12N1/19;C12N1/21;C12P7/64;C12R1/19;C12R1/865
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 林娟

1.一種二酰甘油酰基轉移酶1，其特征在于，所述二酰甘油酰基轉移酶1為由SEQ IDNo.1所示的氨基酸序列組成的蛋白質。

2.編碼權利要求1所述二酰甘油酰基轉移酶1的基因。

3.攜帶權利要求2所述基因的重組質粒。

4.如權利要求3所述的重組質粒，其特征在于，所述重組質粒的載體為pYES2載體。

5.攜帶權利要求2所述基因或權利要求3或4所述重組質粒的宿主細胞。

6.如權利要求5所述的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞為釀酒酵母或大腸桿菌。

7.權利要求1所述二酰甘油酰基轉移酶1的制備方法，其特征在于，所述方法為使用權利要求5或6所述宿主細胞，將權利要求5或6所述宿主細胞加入到不含尿嘧啶的培養基中培養36~48 h后收集菌體，將收集的菌體加入到不含葡萄糖而含有半乳糖的培養基中至OD₆₀₀=0.3~0.5后繼續誘導培養48~96 h，得到二酰甘油酰基轉移酶1；所述不含尿嘧啶的培養基為SC-U液體培養基；所述含有半乳糖的培養基為SC-U誘導培養基。

8.權利要求1所述二酰甘油酰基轉移酶1或權利要求2所述基因或權利要求3或4所述重組質粒或權利要求5或6所述宿主細胞或權利要求7所述制備方法在生產甘油三酯方面的應用。

9.一種生產甘油三酯的方法，其特征在于，所述方法為使用權利要求5或6所述宿主細胞，將權利要求5或6所述宿主細胞加入到不含尿嘧啶的培養基中培養36~48 h后收集菌體，將收集的菌體加入到不含葡萄糖而含有半乳糖的培養基中至OD₆₀₀=0.3~0.5后繼續誘導培養48~96 h，得到甘油三酯；所述不含尿嘧啶的培養基為SC-U液體培養基；所述含有半乳糖的培養基為SC-U誘導培養基。

10.如權利要求9所述的一種生產甘油三酯的方法，其特征在于，所述培養的溫度為28~30℃、轉速為200~250 rpm。