[發明專利]一種可供注射給藥的海參皂苷納米脂質體及其制備方法

有效

• 申請號: 201910203903.2
• 申請日: 2019-03-18
• 公開（公告）號: CN109758425B
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: 薛長湖;李紅燕;崔歡歡;柯梟;徐杰;王玉明;李兆杰
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K31/7048;A61K47/28;A61K47/24;A61P35/00;C07J21/00
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本發明涉及藥物載體領域，具體涉及一種可供注射給藥的海參皂苷納米脂質體及其制備方法。所述海參皂苷納米脂質體由磷脂與膽固醇組成的雙分子層膜和中心藥物海參皂苷組成，包封率達99％以上且無溶血毒性。本發明通過將海參皂苷包裹于脂質雙分子層中制備海參皂苷納米脂質體，克服了海參三萜皂苷的溶血毒性，為海參皂苷作為抗腫瘤藥物的研究與開發提供一個安全有效的載藥系統。

技術領域

本發明涉及藥物載體領域，具體涉及一種可供注射給藥的海參皂苷納米脂質體及其制備方法。

背景技術

海參(seacucumber)隸屬于棘皮動物門(Echinoermata)、海參綱(Holothuroidea)、楯手目(Aspidochirota)動物，是一種珍貴的滋補藥材。明代《食物本草》中記載海參有補元氣、滋養五臟六腑和虛損的養生功能。清朝《本草綱目拾遺》將海參列為補益藥物。海參中含有皂苷、脂肪酸、神經節苷脂和多糖等多種重要的生物活性物質，具有抗腫瘤、抗凝血、抗病毒、延緩衰老及增強免疫力等廣泛的藥理學作用。因此，從海參中提取分離生物活性物質成為研究熱點之一。海參皂苷是海參體內重要的次生代謝產物，作為海參的化學防御物質，是毒素的主要成分。海參皂苷一般為三萜皂苷，它不僅對海參的生存具有重要的意義，而且還有抗腫瘤、抗菌、細胞毒性、溶血等藥理活性。海參皂苷對腫瘤細胞的增殖具有較強的抑制活性，但是海參皂苷的強溶血毒性限制了其體內注射的應用。

脂質體作為網狀內皮系統最成功的藥物遞送載體之一，具有制備簡單、組織相容性好、細胞親和性好、毒副作用低、靶向性和緩釋性等優點。目前，脂質體作為抗腫瘤藥物載體已受到國內外研究者的關注。

發明內容

本發明要解決的技術問題是海參皂苷對腫瘤細胞的增殖具有較強的抑制活性，但是海參皂苷的強溶血毒性限制了其體內注射的應用。

為解決上述問題，本發明將海參皂苷包裹于脂質雙分子層中制備海參皂苷納米脂質體，克服了海參三萜皂苷的溶血毒性，為海參皂苷作為抗腫瘤藥物的研究與開發提供一個安全有效的載藥系統。

為實現上述目的，本發明具體通過以下技術方案實現，一種可供注射給藥的海參皂苷納米脂質體，所述海參皂苷納米脂質體由磷脂與膽固醇組成的雙分子層膜和中心藥物海參皂苷組成，包封率達99％以上且無溶血毒性。

一種上述海參皂苷類納米脂質體的制備方法，包括以下步驟：

(1)海參皂苷提取：海參經干燥、粉碎、乙醇水溶液脫脂和提取、離心，將上清液減壓濃縮、冷凍干燥，得海參總皂苷A；

(2)海參皂苷分離純化：步驟(1)中的海參總皂苷A經大孔樹脂柱層析、正相硅膠柱層析、減壓反相硅膠柱層析分離純化，得海參皂苷單體化合物EA；

(3)海參皂苷納米脂質體制備：以磷脂和膽固醇為壁材，海參皂苷單體化合物EA為包封藥物，采用薄膜分散法制備海參皂苷納米脂質體。

進一步的，海參皂苷提取步驟具體為海參經低溫干燥、粉碎機粉碎，用體積比50％～70％乙醇水溶液室溫機械攪拌提取3～5次，提取液離心，合并上清液減壓濃縮、冷凍干燥，得海參總皂苷A。

進一步的，海參皂苷分離純化步驟具體為：步驟(1)中的海參總皂苷A利用HP-20型大孔樹脂進行分離純化，收集體積比50％～70％乙醇洗脫組分，減壓濃縮，冷凍干燥得海參總皂苷B；海參總皂苷B經正相硅膠柱層析分離純化，收集體積比氯仿：甲醇：水＝7：1～3：0.1～0.3的洗脫組分；將該洗脫組分再次經減壓反相硅膠ODS進一步純化，60％(v/v)甲醇水溶液減壓洗脫，薄層檢測收集皂苷組分，得海參皂苷單體化合物EA，其結構式為

分子量為1184.5。

進一步的，海參皂苷納米脂質體制備步驟具體為：