[發明專利]一種松柏醇和松脂醇的同步檢測方法

有效

• 申請號: 201910196937.3
• 申請日: 2019-03-15
• 公開（公告）號: CN109781905B
• 公開（公告）日: 2021-08-31
• 發明（設計）人: 蔡永萍;李國輝;程曦;張晴晴;王涵;孫燕銘;江桃山;金青;林毅
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 合肥興東知識產權代理有限公司 34148
• 代理人: 王偉

本發明涉及物質分離檢測領域，提供了一種松柏醇和松脂醇的同步檢測方法，首先，采用高效液相色譜法測定待測樣品中的松柏醇與松脂醇的吸光度，其中，檢測波長為280nm；所述高效液相色譜法采用梯度洗脫，梯度洗脫中的洗脫劑包括甲醇和水；然后根據松柏醇的標準曲線和待測樣品中松柏醇的吸光度，得到所述待測樣品中松柏醇的濃度；根據松脂醇的標準曲線和待測樣品中松脂醇的吸光度，得到所述待測樣品中松脂醇的濃度。本發明提供的方法能夠有效分離待測樣品中的松柏醇與松脂醇，并分別檢測出松柏醇與松脂醇的相應濃度。

技術領域

本發明涉及物質分離檢測領域，尤其涉及一種松柏醇和松脂醇的同步檢測方法。

背景技術

松柏醇與松脂醇是梨次生代謝形成木質素過程中的關鍵中間代謝產物，它們在植物體中都分布廣泛。其中，松脂醇是由兩分子松柏醇聚合而成，這種二聚體，又稱為木脂素，可以將更多的木質素單體偶聯形成木質素的聚合物。通過研究松柏醇和松脂醇的含量變化，有利于更好的研究梨的代謝途徑。但是，現今尚未發現一種能夠分離梨及其他植物中松柏醇和松脂醇，并對梨或其他植物中松柏醇和松脂醇含量進行檢測的方法。

目前，無論是化學領域還是在生物領域，對松柏醇和松脂醇兩種化學物質的研究都較少。松柏醇的結構如結構式I所示，松脂醇的結構如結構式II所示。

由于松柏醇和松脂醇的結構較為相近，使得其理化性質也較為相似，因此目前無法用一種簡單有效的方法將松柏醇和松脂醇分離開來，也無法檢測松柏醇和松脂醇的含量。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供一種既能有效分離松柏醇與松脂醇，又能同時檢測二者濃度的松柏醇和松脂醇的同步檢測方法。

本發明采用以下技術方案解決上述技術問題：

一種松柏醇和松脂醇的同步檢測方法，包括以下步驟：

(1)采用高效液相色譜法測定待測樣品中松柏醇的吸光度和松脂醇的吸光度；

所述高效液相色譜法的檢測器為紫外檢測器，檢測波長為280nm；

所述高效液相色譜法采用梯度洗脫，所述梯度洗脫包括依次進行的四個梯度，具體為第一梯度洗脫、第二梯度洗脫、第三梯度洗脫和第四梯度洗脫；所述梯度洗脫中洗脫劑包括甲醇和水，所述四個梯度中洗脫劑的流速獨立地為0.8～1.2mL/min；所述第一梯度洗脫、第二梯度洗脫、第三梯度洗脫、第四梯度洗脫梯度洗脫用洗脫劑中甲醇的體積濃度依次增加10～20％；

(2)根據松柏醇的標準曲線和步驟(1)得到的待測樣品中松柏醇的吸光度，得到待測樣品中松脂醇的濃度；根據松脂醇的標準曲線和步驟(1)得到的待測樣品中松脂醇的吸光度，得到待測樣品中松脂醇的濃度；

所述松柏醇的標準曲線為松柏醇的濃度與松柏醇對應吸光度的線性曲線；

所述松脂醇的標準曲線為松脂醇的濃度與松脂醇對應吸光度的線性曲線。

作為本發明的優選方式之一，所述四個梯度中洗脫劑的組成如下：

第一梯度洗脫用洗脫劑中甲醇和水的體積比為(20～35)：(65～80)；

第二梯度洗脫用洗脫劑中甲醇和水的體積比為(35～50)：(50～65)；

第三梯度洗脫用洗脫劑中甲醇和水的體積比為(50～65)：(35～50)；

第四梯度洗脫用洗脫劑中甲醇和水的體積比為(65～80)：(20～35)。

作為本發明的優選方式之一，所述四個梯度中洗脫劑的組成具體如下：

第一梯度洗脫用洗脫劑中甲醇和水的體積比為30:70；