[發明專利]一種胰島素的修飾改性方法

有效

• 申請號: 201910190552.6
• 申請日: 2019-03-13
• 公開（公告）號: CN109999181B
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發明（設計）人: 馮岸超;潘翔宇;沈家鋒;湯華燊;張立群
• 申請（專利權）人: 北京化工大學
• 主分類號: A61K38/28
• 分類號: A61K38/28;A61K47/58;A61K47/60;A61P3/10;C08F8/00;C08F120/20;C08F120/14;C08F120/28
• 代理公司: 北京思海天達知識產權代理有限公司 11203
• 代理人: 劉萍

1.一種胰島素的修飾改性方法，其特征在于，包括如下步驟:

(1)將胰島素溶解于溶劑中，加入三乙胺調節pH，以上述胰島素與三乙胺的摩爾比為5:1～10:1；加入胰島素質量的1～10％的二叔丁基二碳酸酯在常溫下攪拌10～60min；之后加入胰島素質量50-150％的乙酸和水混合溶劑停止反應，乙酸與水摩爾比為0.1～1；冷凍干燥用水與乙腈摩爾比為0.1～1的混合溶液溶解通過C4的液相色譜柱分離得到產物A；

(2)將水溶性聚合物單體溶解于溶劑中，加入單體質量的10～40％的RAFT試劑和單體質量0.01～0.1％的引發劑，搖勻轉移入楊氏試管中，冷凍抽排2～5次后放于50-70℃油浴鍋反應10～24h后通空氣降溫停止反應標記為產物B；

(3)稱取產物A，產物B，兩者摩爾比為1～10，加入三乙胺調節pH值，以上述產物A與三乙胺的摩爾比為5:1～10:1，加入溶劑溶解在20～50℃條件下反應10-30h，經透析、冷凍干燥得產物C；

(4)將產物C溶解于水中，加入產物C質量的10～50％三氟乙酸進行反應1～10h，經透析后冷凍干燥得到聚合物與胰島素的耦合體產物D；

所述的水溶性聚合物為聚-2-甲基-2-丙烯酸-2-(2-甲氧基乙氧基)乙酯或甲基丙烯酸甲酯；RAFT試劑為S-乙基-S′-(2-甲基-2-丙酸基)三硫代碳酸酯或1-琥珀酰亞胺-4-氨基-4-(N-甲基-N-4-吡啶氨基甲硫酸硫酯)戊酸；引發劑為偶氮二異丙基咪唑啉或過氧化苯甲酰叔丁酯。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的胰島素為豬型、牛型、人型或者通過生物工程方法合成的胰島素。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的胰島素溶解的溶劑為水，DMSO或DMF。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述的單體溶解溶劑為DMF，DMSO，DMAc，甲醇，乙醇，二氧六環，乙腈，四氫呋喃，丙酮，二氯甲烷。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：反應得到的聚合物與胰島素的耦合體D，其結構式如(1)所示