[發(fā)明專利]一種白芨試管球莖壯大培養(yǎng)方法

在審

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• 申請日: 2019-03-05
• 公開（公告）號: CN109717078A
• 公開（公告）日: 2019-05-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄒娜;黃穎融;周樹軍;鄧光華;林慶良;喻蘇琴
• 申請（專利權(quán)）人: 江西農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 福州市眾韜專利代理事務(wù)所(普通合伙) 35220
• 代理人: 陳智雄;黃秀婷

本發(fā)明涉及一種白芨試管球莖壯大培養(yǎng)方法，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，通過對培養(yǎng)基成分的調(diào)控，提供一種包括結(jié)球培養(yǎng)和試管球莖壯大培養(yǎng)的白芨試管球莖壯大培養(yǎng)方法。本發(fā)明的培養(yǎng)方法，促使白芨試管球莖壯大的效果非常好，首次解決了白芨常規(guī)組織培養(yǎng)過程中，試管苗的球莖重量輕、直徑小的問題。試管球莖貯藏的養(yǎng)分能為幼苗生長發(fā)育提供大量營養(yǎng)，因此可用試管球莖替代試管苗進行移栽，從而可有效解決移栽后地上部容易枯萎、成活率低的難題。此外，由于不受季節(jié)限制，可以根據(jù)需要隨時進行誘導、壯大，且具有不受外界環(huán)境影響等優(yōu)點，可在短時間內(nèi)獲得大量高質(zhì)量的離體快繁材料，有利于育種和規(guī)模化生產(chǎn)。本培養(yǎng)方法操作簡單，實用性強、推廣性好。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種試管球莖壯大培養(yǎng)方法，具體涉及白芨試管球莖壯大培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

白芨(Bletilla striata)為蘭科白芨屬多年生草本植物，其花大色艷，集觀賞和藥用價值于一體(石晶，2010)。由于野生白芨資源遭到過度采挖，加上白芨種子在自然條件下繁殖困難，其野生資源已急劇減少，因此白芨已被我國列為珍稀瀕危保護植物(陸峻波等，2011)。迄今，有關(guān)白芨屬植物的研究報道主要集中于栽培技術(shù)(張滿常等，2015；陳潤澤，2018)、藥理與臨床(王曉等，2017；胡長玉等，2018)、組織培養(yǎng)與快繁技術(shù)探討(管常東等，2010；鄒娜等，2013)等方面，也有部分關(guān)于資源與利用(石晶，2010)和細胞懸浮體系建立(劉軍凱，2012)的報道。白芨的繁殖以分生繁殖為主，分生系數(shù)小，植株生長周期較長，且耗種量大，不宜進行大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)(張亦誠，2007)。組織培養(yǎng)技術(shù)具有繁殖系數(shù)高、受外界環(huán)境條件限制小等特點，可在短時間內(nèi)獲得大量材料實現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)。在白芨的常規(guī)組織培養(yǎng)過程中，試管苗的球莖重量輕、直徑小，移栽后地上部容易枯萎、成活率低，大多數(shù)在移栽后第2年也未能達到商業(yè)生產(chǎn)標準，而用試管球莖替代試管苗進行移栽，因試管球莖貯藏的養(yǎng)分能為幼苗生長發(fā)育提供大量營養(yǎng)，可有效解決移栽后無菌苗成活率低的問題(劉旭忻等，2015)，但目前有關(guān)白芨試管球莖壯大培養(yǎng)基配方篩選的研究尚未見報道。因此，篩選白芨試管球莖壯大培養(yǎng)基配方，對其種苗的離體快繁和工業(yè)化生產(chǎn)具有重要意義。

建立在試管苗培育基礎(chǔ)之上的試管球莖壯大技術(shù)(任亞萍，2008)，已經(jīng)在百合和石蒜等植物相關(guān)研究中取得了一定成果(張延龍等，2006；任亞萍等，2011；張彥妮等，2016；劉旭忻等，2018)。眾多試驗結(jié)果表明，植物激素直接參與了百合試管鱗莖的誘導和發(fā)育，其種類和濃度對百合鱗莖壯大具有一定促進作用(蘇菁華，2014)。Varshney等(2000)、朱錦等(2002)和王光萍等(2005)研究發(fā)現(xiàn)，蔗糖是培養(yǎng)基中的碳源，能為植物提供營養(yǎng)物質(zhì)，具有促進植物生長的作用，較高濃度的蔗糖能刺激百合和石蒜鱗莖形成和壯大。張延龍等(2006)、張潔等(2010)和張艷波(2013)研究認為，用于誘導百合試管鱗莖形成及壯大的培養(yǎng)基主要為MS，但培養(yǎng)基中不同濃度的大量元素也會對鱗莖的形成和壯大產(chǎn)生影響。蘇菁華(2014)的研究結(jié)果顯示，培養(yǎng)基中6-BA和NAA濃度均為0.5mg/L時渥丹和川百合小鱗莖的壯大效果最佳。此外，在培養(yǎng)基中添加適宜含量的活性炭(AC)，對百合鱗莖發(fā)育也有一定成效(Bong et al.，2005；胡鳳榮等，2006；王曉麗等，2011；秦新惠等，2015)。已有研究表明，納金花屬(Lachenalia)3種植物以及乳白石蒜(Lycoris albiflora)和中國石蒜(Lycorischinensis)等移栽后其試管鱗莖的成活率與試管鱗莖的大小直接相關(guān)，試管苗形成的鱗莖愈大愈能提高移栽成活率(Slabbert&Niederwieser，1999；楊曦，2013)，但目前尚未見白芨球莖壯大培養(yǎng)及用球莖替代試管苗進行移栽的相關(guān)研究報道。

探討植物生長調(diào)節(jié)劑種類和濃度配比、基本培養(yǎng)基、蔗糖和活性炭含量對白芨試管球莖壯大的影響，旨在探索短時間內(nèi)促使白芨試管球莖壯大的方法，篩選出最適白芨球莖壯大培養(yǎng)基配方，進而用試管球莖替代試管苗進行移栽，為白芨的離體快繁、育種和工業(yè)化生產(chǎn)提供參考依據(jù)。

發(fā)明內(nèi)容