[發(fā)明專利]一種用于提高ALPPS誘導(dǎo)肝組織生長率的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201910160979.1
• 申請日: 2019-03-04
• 公開（公告）號: CN109749985A
• 公開（公告）日: 2019-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 于劍;田虎;付真;張玲玲
• 申請（專利權(quán)）人: 山東省千佛山醫(yī)院
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
• 代理公司: 北京金蓄專利代理有限公司 11544
• 代理人: 陳雷

本發(fā)明提供一種用于提高ALPPS誘導(dǎo)肝組織生長率的方法，涉及醫(yī)學(xué)研究技術(shù)領(lǐng)域。該用于提高ALPPS誘導(dǎo)肝組織生長率的方法，同時對雄性大鼠通過不同的手術(shù)方法進(jìn)行肝臟切除后，再對傳統(tǒng)一組、改良一組及改良B組中的大鼠，在手術(shù)結(jié)束后并持續(xù)跟進(jìn)并進(jìn)行相關(guān)影響因子的注入。該用于提高ALPPS誘導(dǎo)肝組織生長率的方法，通過對傳統(tǒng)一組、改良一組進(jìn)行術(shù)后一定時間段內(nèi)對大鼠進(jìn)行促進(jìn)肝臟再生的相關(guān)蛋白的注入，通過多個時間點對大鼠致死處理，并對肝臟再生情況的評估，使觀察者可以清晰直觀得到肝組織生長率的變化，從而進(jìn)一步幫助觀察者進(jìn)行更加精細(xì)的數(shù)值調(diào)控得到完整的數(shù)據(jù)，同時該方法具有操作簡單，手術(shù)時間短，數(shù)據(jù)收集周期短等優(yōu)點。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)研究技術(shù)領(lǐng)域，具體為用于提高ALPPS誘導(dǎo)肝組織生長率的方法。

背景技術(shù)

肝臟具有強大的代謝功能和再生能力,但在正常生理狀態(tài)下,絕大部分肝細(xì)胞處于靜息狀態(tài),在受到感染、中毒等肝損傷,或者大部肝切除等刺激后,肝細(xì)胞會迅速開始分裂,表現(xiàn)出驚人的再生能力和功能代償能力,這使得活體肝移植術(shù)后肝臟的結(jié)構(gòu)和功能恢復(fù)到正常水平成為可能。

其中，對于肝癌患者來說，肝癌的完整切除是肝癌患者獲得根治性治療效果的最主要途徑,切除術(shù)后足夠的剩余肝臟體積是避免肝衰竭的必要條件.為了達(dá)到上述目的,誕生了一種全新手術(shù)方式——聯(lián)合肝臟離斷和門靜脈結(jié)扎的二步肝切除術(shù)，通過一階段對肝臟上長有腫瘤部分的肝臟上靜脈血管進(jìn)行夾閉，使血流供應(yīng)至另外一側(cè)，待另外一側(cè)肝臟長至合適比重后，再通過二次手術(shù)將腫瘤側(cè)的肝臟進(jìn)行切除，使患者達(dá)到治愈的效果。

然而，受到患者自身術(shù)后身體狀況的影響，使二次手術(shù)的操作時間變得不易調(diào)整，會出現(xiàn)短期內(nèi)肝臟自身無法快速再生至理想狀態(tài)，從而導(dǎo)致二次手術(shù)時間的延后，進(jìn)而使患者無法得到及時的治療。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明試圖克服以上缺陷，因此本發(fā)明提供了一種用于提高ALPPS誘導(dǎo)肝組織生長率的方法，以達(dá)到了提高肝組織生長速率的效果。

本發(fā)明為解決上述技術(shù)問題，提供如下技術(shù)方案：一種用于提高ALPPS誘導(dǎo)肝組織生長率的方法，包括以下步驟：

S1、選取若干只健康SPF級雄性成年大鼠及SPF級雄性老年大鼠。

S2、將S1中的雄性成年大鼠均分為四組，分別為傳統(tǒng)一組、傳統(tǒng)二組、改良一組和改良二組，同時將雄性老年大鼠均分為傳統(tǒng)A組和改良B組。

S3、將S1中的雄性大鼠以S2中的組類分開后，統(tǒng)一放于恒溫恒濕動物房中，提供標(biāo)準(zhǔn)飼料與清水自由飲食飼養(yǎng)12H后，并在術(shù)前12H時對大鼠禁水。

S4、術(shù)前對所有大鼠進(jìn)行快速誘導(dǎo)麻醉并持續(xù)至手術(shù)結(jié)束，對傳統(tǒng)組大鼠以經(jīng)典法進(jìn)行肝臟切除，對改良組以改良法進(jìn)行肝臟切除。

S5、對進(jìn)行肝臟切除后的傳統(tǒng)一組、改良一組及改良B組中的大鼠，在手術(shù)結(jié)束后30分鐘后注入甲腎上腺激素和胰島素，并在手術(shù)后4小時內(nèi)對大鼠進(jìn)行TNF-α及IL-6的注入，對傳統(tǒng)二組、改良二組和傳統(tǒng)A組進(jìn)行正常放回。

S6、在術(shù)后24小時內(nèi)，對傳統(tǒng)一組和改良一組及改良B組進(jìn)行HGF、CB和CDK的注入。

S7、在術(shù)后48小時內(nèi)，對傳統(tǒng)一組和改良一組及改良B組進(jìn)行HGF的注入。

S8、在術(shù)后6-10小時后對大鼠恢復(fù)飲水，20-24小時后恢復(fù)飼料供給，針對改良B組中的老年大鼠投以特殊飼料進(jìn)行單獨飼養(yǎng)，其余分組的大鼠投以標(biāo)準(zhǔn)飼料及清水進(jìn)行飼養(yǎng)。

S9、在術(shù)后50小時、1天、2天、3天、5天、7天六個時間點對各分組中的大鼠進(jìn)行批量處死解剖，并統(tǒng)計并評估肝臟的再生狀況。

進(jìn)一步，所述1操作步驟中選取的健康大鼠的體重在為190-200g之間，且選取健康成年大鼠80只和老年大鼠40只。