[發明專利]脯氨酸光學探針及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201910149337.1
• 申請日: 2019-02-28
• 公開（公告）號: CN109666068B
• 公開（公告）日: 2022-07-29
• 發明（設計）人: 楊弋;趙玉政;李寫;徐磊;王巧慧
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: C07K14/195
• 分類號: C07K14/195;C07K19/00;C12N15/62;G01N21/64
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陶啟長

1.一種光學探針，包含脯氨酸敏感多肽或其功能變體和光學活性多肽，其中光學活性多肽位于脯氨酸敏感多肽的選自以下的位點：120/121，121/122，121/123，324/330，325/330和326/330，所述脯氨酸敏感多肽如SEQ ID NO:1所示，所述脯氨酸敏感多肽的功能變體在SEQ ID NO:1所示的序列中包含選自以下位點處的一個或的多個突變：F77L，A100G，D121E，D121S，D121T，D121V，D226E，D226N和Y275F。

2.一種核酸序列，其編碼權利要求1所述的光學探針。

3.一種表達載體，其包含與表達控制序列操作性連接的如權利要求2所述的核酸序列。

4.一種宿主細胞，其包含權利要求2所述的核酸序列或權利要求3所述的表達載體。

5.一種制備權利要求1所述的光學探針的方法，包括以下步驟：

(1)將權利要求2所述的表達載體轉移到宿主細胞中，

(2)在適合所述表達載體表達的條件下培養所述宿主細胞，和

(3)由所述宿主細胞分離所述光學探針。

6.權利要求1所述的光學探針或權利要求5所述方法制備的光學探針在制備檢測樣品中的脯氨酸的試劑盒中的應用。

7.一種檢測試劑盒，其包含權利要求1中任一項所述的光學探針或權利要求5所述方法制備的光學探針。

8.一種檢測樣品中脯氨酸的非診斷方法，包括：使權利要求1所述的光學探針與樣品接觸，檢測光學活性多肽的變化，并根據光學活性多肽的變化檢測樣品中的脯氨酸。

9.一種篩選化合物的方法，包括：將候選化合物與表達權利要求1所述的光學探針的細胞接觸，測定光學活性多肽的變化，和根據光學活性多肽的變化篩選出對脯氨酸含量變化有影響的化合物。