[發明專利]一種從產朊假絲酵母發酵液中提取谷胱甘肽的方法

有效

• 申請號: 201910149167.7
• 申請日: 2015-10-30
• 公開（公告）號: CN109750073B
• 公開（公告）日: 2022-03-29
• 發明（設計）人: 梁國斌;汪斌
• 申請（專利權）人: 江蘇理工學院
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02;C07K5/037;C12R1/72
• 代理公司: 常州市江海陽光知識產權代理有限公司 32214
• 代理人: 孫培英

1.一種從產朊假絲酵母發酵液中提取谷胱甘肽的方法，其特征在于包括以下步驟：

①產朊假絲酵母種子培養和發酵；將產朊假絲酵母菌株接種于種子培養基中，28℃～32℃下培養18～28小時，搖床轉速200～250rpm，培養至對數期時停止培養，得到的種子液待發酵培養；

②收集步驟①發酵培養完畢的產朊假絲酵母發酵液，離心后去除上清液，收集的細胞在-15℃～-25℃下冷凍20～30分鐘；

③將步驟②冷凍后的產朊假絲酵母細胞加入硫酸溶液中，硫酸溶液中產朊假絲酵母細胞的濃度為0.08g/mL～0.12g/mL，硫酸溶液的pH值為1～2， 20℃～35℃下放置15～30分鐘后, 產朊假絲酵母細胞內的還原型谷胱甘肽從胞內釋放出來溶解在硫酸溶液中，完成從產朊假絲酵母發酵液中對谷胱甘肽的提取，離心分離，收集上清液。

2.根據權利要求1所述的從產朊假絲酵母發酵液中提取谷胱甘肽的方法，其特征在于：步驟①產朊假絲酵母發酵時，先將種子液按8%～10%的接種量接種在發酵基本培養基中分批培養8～10h，再按照細胞比生長速率0.15h^-1～0.25h^-1指數流加培養11～13h，接著以5.0～6.0g（h﹒L）^-1恒數流加培養23～25h后；向罐內加入三種氨基酸，加入后罐內谷氨酸 5.5～6.5 mmol/L、甘氨酸 5.0～6.0mmol/L、半胱氨酸6.0～7.0 mmol/L，繼續培養25～35h完成產朊假絲酵母的發酵培養。

3.根據權利要求2所述的從產朊假絲酵母發酵液中提取谷胱甘肽的方法，其特征在于：分批培養時所述發酵基本培養基組成為：葡萄糖15 g/L，硫酸銨5 g/L，酵母膏2 g/L，磷酸二氫鉀1.5 g/L，硫酸鎂0.25 g/L，發酵基本培養基的pH 值為5.5；

指數流加培養和恒數流加培養所用的均為流加培養基，流加培養基組成如下：葡萄糖500 g/L，硫酸銨36 g/L，磷酸二氫鉀5 g/L，硫酸鎂0.5 g/L，其中葡萄糖單獨滅菌后與其它成分混合。