[發(fā)明專利]一種大麥籽粒β-葡聚糖提取物純度快速測定的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910130643.0 | 申請日： | 2019-02-21 |
| 公開（公告）號： | CN109632787A | 公開（公告）日： | 2019-04-16 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 巫小建;汪軍妹;楊建明;華為;朱靖環(huán);尚毅 | 申請（專利權(quán)）人： | 浙江省農(nóng)業(yè)科學院 |
| 主分類號： | G01N21/78 | 分類號： | G01N21/78;G01N21/31 |
| 代理公司： | 北京眾合誠成知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11246 | 代理人： | 苗艷榮 |
| 地址： | 310021 浙*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 葡聚糖 葡萄糖 大麥籽粒 快速測定 提取物 水解 酶標儀測定 葡萄糖苷酶 試劑使用量 功能食品 濃度計算 生產(chǎn)應用 提取產(chǎn)物 低聚糖 溶液水 顯色液 糖酶 質(zhì)檢 加熱 加工廠 | ||
1.一種大麥籽粒β-葡聚糖提取物純度快速測定的方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)取β-葡聚糖提取物于緩沖液A中，70℃水浴充分溶解；
2)加入苔聚糖酶溶液溶于緩沖液A，充分混勻水浴1h；
3)加入緩沖液C混勻，在1000g條件下離心5min；
4)取上清分別加入到3個干凈的離心管中，其中兩份加入β-葡糖苷酶溶液，另一份加入緩沖液B，水浴加熱10min；
5)加入顯色液溶液水浴加熱20min后，使用酶標儀測定510nm處值ΔA；
6)根據(jù)葡萄糖濃度計算出β-葡聚糖純度，計算公式如下：
β-gluca(％w/w)＝ΔA×F×92×1/1000×100/W×162/180
其中，ΔA為樣品吸光值－空白吸光值，F(xiàn)為100/100μg葡萄糖吸光值，W為β-葡聚糖提取物樣品重量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的β-葡聚糖提取物純度快速測定的方法，其特征在于，所述的緩沖液A為：磷酸鈉緩沖液，20mM，p6.5。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的β-葡聚糖提取物純度快速測定的方法，其特征在于，所述的緩沖液B為：醋酸鈉緩沖液，50mM，pH4.0。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的β-葡聚糖提取物純度快速測定的方法，其特征在于，所述的緩沖液C為：醋酸鈉緩沖液，200mM，pH4.0。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的β-葡聚糖提取物純度快速測定的方法，其特征在于，所述的顯色液為將溶液A與溶液B以9:1混合得到，所述的溶液A為：取900mL緩沖液A，加入94mg苯酚，定容至1L，配制成10mmol/L的苯酚溶液；所述的溶液B為取90mL緩沖液A，稱入277.78mg葡萄糖氧化酶、66.67mg辣根過氧化物酶、410mg 4-氨基安替吡啉，混勻后定容到100mL。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的β-葡聚糖提取物純度快速測定的方法，其特征在于，步驟(2)、(4)和(5)中水浴加熱的條件為40℃。
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