[發明專利]一種丙烯酸降解菌及其應用

有效

• 申請號: 201910097792.1
• 申請日: 2019-01-31
• 公開（公告）號: CN109576197B
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發明（設計）人: 范昌海;賈明;蘇云偉;周云劍;石露;楊衛東;高軍;寇亮
• 申請（專利權）人: 平湖石化有限責任公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/19;C02F101/34
• 代理公司: 上海開祺知識產權代理有限公司 31114
• 代理人: 張曉敏;費開逵

1.一種丙烯酸降解菌，其為大腸桿菌(Escherichica coli)WX，保藏編號為CCTCC NO：M2018746。

2.根據權利要求1所述丙烯酸降解菌，其特征在于，所述大腸桿菌WX的16S rDNA序列如SEQ ID No.1所示。

3.根據權利要求1或2所述丙烯酸降解菌，其特征在于，所述大腸桿菌WX的菌落顏色為白色，呈單個菌落，無芽孢，不透明，表面光滑，邊緣整齊；透射電鏡下觀察該菌體的形態為短桿菌，具有周生鞭毛。

4.如權利要求1所述丙烯酸降解菌在生物降解丙烯酸中的應用。

5.利用權利要求1所述丙烯酸降解菌降解丙烯酸的方法，包括以下步驟：

1)將大腸桿菌WX經發酵培養，獲得發酵液，即含菌細胞懸液；

2)將含菌細胞懸液接種至丙烯酸液體選擇培養基中，以丙烯酸為碳源進行培養，降解丙烯酸，其中，培養條件為：28～30℃、140～160rpm，pH為6.0～8.0。

6.根據權利要求5所述降解丙烯酸的方法，其特征在于，步驟2)所述丙烯酸液體選擇培養基中，各組分的終濃度為：NH₄Cl 1400～1500mg·L^-1，Na₂HPO₄ 5000～6000mg·L^-1，KH₂PO₄2800～3000mg·L^-1，NaCl 900～1000mg·L^-1，酵母浸粉1400～1500mg·L^-1，蛋白胨2800～3000mg·L^-1，丙烯酸200～3000mg·L^-1，MgSO₄·7H₂O 15～16mg·L^-1，CaCl₂ 3.8～4mg·L^-1，CuSO₄ 3.8～4mg·L^-1，FeSO₄ 3.8～4mg·L^-1，MnSO₄ 3.8～4mg·L^-1，溶劑為水，pH值6.0～8.0。

7.根據權利要求5所述降解丙烯酸的方法，其特征在于，步驟2)中，所述含菌細胞懸液的OD₆₀₀值為1.0～1.8，含菌細胞懸液的體積接種量為1％～10％。

8.根據權利要求5所述降解丙烯酸的方法，其特征在于，步驟1)所述含菌細胞懸液的制備方法為：

a)斜面培養

將大腸桿菌WX接種至斜面培養基，28～30℃培養70～72h，獲得菌體斜面；

所述斜面培養基終濃度組成為：NH₄Cl 1400～1500mg·L^-1，Na₂HPO₄ 5000～6000mg·L^-1，KH₂PO₄ 2800～3000mg·L^-1，NaCl 900～1000mg·L^-1，酵母浸粉1400～1500mg·L^-1，蛋白胨2800～3000mg·L^-1，丙烯酸200-3000mg·L^-1，MgSO₄·7H₂O 15～16mg·L^-1，CaCl₂ 3.8～4mg·L^-1，CuSO₄ 3.8～4mg·L^-1，FeSO₄ 3.8～4mg·L^-1，MnSO₄ 3.8～4mg·L^-1，溶劑為水，pH值7.0～7.5，瓊脂18～20g·L^-1；

b)種子培養

從菌體斜面挑取菌落接種至LB培養基進行種子培養，于28～30℃培養10～12h，獲得種子液；

c)發酵培養

將種子液以體積濃度1～10％的接種量接種至發酵培養基進行發酵培養，培養溫度28～30℃，獲得含菌細胞懸液；

所述發酵培養基中，各物質的終濃度為：NH₄Cl 1400～1500mg·L^-1，Na₂HPO₄ 5000～6000mg·L^-1，KH₂PO₄ 2800～3000mg·L^-1，NaCl 900～1000mg·L^-1，酵母浸粉1400～1500mg·L^-1，蛋白胨2800～3000mg·L^-1，丙烯酸200-3000mg·L^-1，MgSO₄·7H₂O 15～16mg·L^-1，CaCl₂ 3.8～4mg·L^-1，CuSO₄ 3.8～4mg·L^-1，FeSO₄ 3.8～4mg·L^-1，MnSO₄ 3.8～4mg·L^-1，溶劑為水，pH值7.0～7.5。