[發明專利]一種鑒定辛硫磷在淡水魚不同組織中代謝產物的方法

有效

• 申請號: 201910096527.1
• 申請日: 2019-01-30
• 公開（公告）號: CN109813820B
• 公開（公告）日: 2022-02-18
• 發明（設計）人: 劉永濤;艾曉輝;董靖;王楨月;胥寧;楊秋紅;楊移斌;周順
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院長江水產研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/60;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所(普通合伙) 42001
• 代理人: 江麗麗;王敏鋒

1.一種鑒定辛硫磷在淡水魚不同組織中代謝產物的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）樣品處理

分別稱取血漿以及肝臟、腎臟、鰓、腸、皮膚、肌肉組織的樣品，依次加入提取劑A和凈化劑B，渦旋振蕩后離心，收集提取液，用提取劑A重復提取樣品殘渣，合并提取液，氮氣吹干后用甲醇定容，經0.22μm的濾膜過濾，濾液供UPLC-Q-TOFMS檢測；

所述的提取劑A為乙腈和乙酸乙酯以體積比5：1混合；

所述的凈化劑為無水硫酸鎂和十八烷基硅烷鍵合硅膠以質量比10:1混合；

（2）UPLC-QTOFMS定性分析

利用超高效液相色譜串聯四級桿飛行時間高分辨率質譜技術檢測各組織樣品，測得化合物的保留時間和離子質量，與辛硫磷、O,O,O^’,O^’,-四乙基二硫逐磷酸酯和O,O-二乙基硫代磷酸的保留時間和離子質量進行比對，判斷各組織樣品的代謝產物；

UHPLC分析條件具體為：C18色譜柱，100 mm×2.1 mm×1.8 μm；柱溫：30 ℃，流速：0.25mL/min；流動相：有機相為甲醇，水相為0.1%甲酸水溶液，梯度洗脫程序：起始梯度有機相為10%的甲醇和水相為90%的0.1%甲酸水溶液，維持1 min，然后在5 min內有機相線性上升到體積濃度為90%的甲醇，水相線性下降為10%的0.1%甲酸水溶液，維持4 min，0.1 min內有機相體積線性下降到10%的甲醇，水相體積線性上升到90%，最后維持1.9 min；進樣體積為5.0μL；

QTOFMS分析條件具體為：電噴霧離子源，正離子模式，掃描范圍為M/Z 100～1000 Da，積累時間0.199957 secs；飛行時間質譜掃描的產物離子質量范圍為50～1000 Da，去簇電壓：45 V，碰撞能量為35 eV，擴展碰撞能量為15.0 eV；離子釋放延遲為67 ，離子釋放寬度為25，離子源：雙噴霧離子源，噴霧氣為50 Psi，輔助加熱氣為55 Psi，氣窗氣為25 Psi，離子化溫度為400 ℃，正離子噴霧電壓 5500 V。