[發(fā)明專利]一種測(cè)量肌酸激酶同工酶含量的改良型試劑制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910095687.4
• 申請(qǐng)日: 2019-01-31
• 公開（公告）號(hào): CN109709325A
• 公開（公告）日: 2019-05-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊蘇民;鄒志良
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河北艾歐路生物科技有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): G01N33/573
• 分類號(hào): G01N33/573;G01N33/68
• 代理公司: 石家莊知住優(yōu)創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 13131
• 代理人: 王麗巧

1.一種測(cè)量肌酸激酶同工酶含量的改良型試劑制備方法，其特征在于，包括兩種試劑分別為：R1試劑和R2試劑；

R1試劑由咪唑、D(+)-葡萄糖、二乙三胺五乙酸、亞硫酸鈉、醋酸鎂、ADP-K、AMP、N-乙酰半胱氨酸、NaDP-Na、A5-PP、NaN3、已糖激酶和G6-P-DH按照以下重量配比制成：5-10g：0.7-1.2g：0.7-1.2g：0.1-0.5g：1-5g：0.9-1.4g：1-5g：2-7g：1-5g：0.012-0.016g：0.8-1.2g：7-12ku：2-7ku；

R2試劑由CAPSO free acid、D(+)-葡萄糖、CREATINE PHOSPHATE和NaN3按照以下重量配比制成：2-7g：7-12g：20-70g：1-5g；

一種測(cè)量肌酸激酶同工酶含量的改良型試劑制備方法，包括以下步驟：

1)R1試劑原料的測(cè)量：

使用測(cè)量裝置測(cè)量咪唑、D(+)-葡萄糖、二乙三胺五乙酸、亞硫酸鈉、醋酸鎂、ADP-K、AMP、N-乙酰半胱氨酸、NaDP-Na、A5-PP、NaN3和已糖激酶的重量，并依次加入量筒的內(nèi)部攪拌混合，備用；

2)R1試劑的調(diào)試：

將混合后的咪唑、D(+)-葡萄糖、二乙三胺五乙酸、亞硫酸鈉、醋酸鎂、ADP-K、AMP、N-乙酰半胱氨酸、NaDP-Na、A5-PP、NaN3和已糖激酶用5mol/L的NaOH/HCl溶液調(diào)節(jié)pH值至6.75，誤差為±0.05；

3)R1試劑的制備：

測(cè)量所需重量的G6-P-DH，并將測(cè)量后的G6-P-DH放入調(diào)節(jié)PH值后的溶劑中進(jìn)行攪拌混合，制備完成，將制備完成的R1試劑放入試劑盒的內(nèi)部，備用；

4)R2試劑原料的測(cè)量：

使用測(cè)量裝置測(cè)量足量的CAPSO free acid，使用測(cè)量裝置測(cè)量足量D(+)-葡萄糖、CREATINE PHOSPHATE和NaN3，備用；

5)R2試劑的調(diào)試：

將測(cè)量好的CAPSO free acid用5mL/L的NaOH/HCl溶液調(diào)節(jié)pH值至9.00，誤差為±0.05，備用；

6)R2試劑的制備：

將的CAPSO free acid放入測(cè)量好的D(+)-葡萄糖、CREATINE PHOSPHATE和NaN3進(jìn)行攪拌混合，放入試劑盒的內(nèi)部，備用；

7)試劑的混合：

將制備好的R1試劑和R2試劑混合在一起，備用；

8)CK-MB抗體的測(cè)量：

使用測(cè)量裝置測(cè)量2-7mL的CK-MB抗體，備用；

9)CK-MB抗體檢測(cè)：

將CK-MB抗體放入R1和R2混合試劑的內(nèi)部，用抗人M血清抑制M亞單位，然后測(cè)定剩余的B亞單位活性，在340nm的波長(zhǎng)下測(cè)量B亞單位活性在做相應(yīng)運(yùn)算即得CK-MB活性，備用；

10)檢測(cè)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)：

對(duì)檢測(cè)的數(shù)據(jù)進(jìn)行記錄，并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行直接計(jì)算，完成。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)量肌酸激酶同工酶含量的改良型試1劑制備方法，其特征在于，所述D(+)-葡萄糖、二乙三胺五乙酸、亞硫酸鈉、醋酸鎂、ADP-K、AMP、N-乙酰半胱氨酸、NaDP-Na和A5-PP質(zhì)量的誤差為±0.01g。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)量肌酸激酶同工酶含量的改良型試劑制備方法，其特征在于，所述咪唑的質(zhì)量的誤差為±0.1g。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)量肌酸激酶同工酶含量的改良型試劑制備方法，其特征在于，所述NaN3已糖激酶和G6-P-DH的質(zhì)量的誤差為±0.001g。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)量肌酸激酶同工酶含量的改良型試劑制備方法，其特征在于，所述CAPSO free acid、D(+)-葡萄糖、CREATINE PHOSPHATE和NaN3的質(zhì)量的誤差為±0.05g。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)量肌酸激酶同工酶含量的改良型試劑制備方法，其特征在于，所述CK-MB抗體的質(zhì)量的誤差為±0.01mL。