[發明專利]血液中circ-TTC17分子標志物在食管鱗癌診斷試劑的應用

在審

• 申請號: 201910095345.2
• 申請日: 2019-01-31
• 公開（公告）號: CN110157803A
• 公開（公告）日: 2019-08-23
• 發明（設計）人: 康寧;朱桂芳;曹秀峰
• 申請（專利權）人: 江蘇萬成生物醫學研究院有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/113
• 代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司 32206
• 代理人: 葉涓涓

本發明公開了一種血液中circ?TTC17分子標志物在食管鱗癌診斷試劑的應用，涉及circ?TTC17分子標志物的發現、檢測、應用，設計并合成出特異性用于實時定量PCR的檢測引物。血液中的circ?TTC17可作為ESCC患者的血漿標志物，針對目標人群對食管癌內鏡篩查依從性差，以及臨床上確診的食管鱗癌患者絕大多數都是中晚期的現狀，在食管鱗狀細胞癌變進程中找到理想的分子預警信號，有針對性的進行內鏡檢查，病理確診，以減輕病人痛苦，避免過度醫療，節省醫療資源。

技術領域

本發明涉及腫瘤分子生物學領域，具體為一種血液中circ-TTC17分子標志物在食管鱗癌診斷試劑的應用。

背景技術

食管癌是嚴重威脅人類健康的最常見惡性腫瘤之一，主要有兩種病理分型：鱗癌和腺癌。 90％的食管癌是鱗狀細胞癌，其分布具有明顯的地域差異。我國ESCC發病率占全世界70％以上，預后較差，5年總體生存率只有15％-25％。2016年臨床醫師癌癥雜志報道，食管癌已經成為中國發病率最高的五種腫瘤之一，其發病率在男性中排第三位，女性中排第五位。

環狀RNA(circRNAs)是一種新的內源性非編碼RNA，在20世紀90年代早期被確定為亂序外顯子的轉錄本，其結構、功能和機制被相繼報道，成為后來20年的研究熱點。不同于以 5'端和3'端為末端的傳統線性RNA，circRNAs是缺少5'端帽和3'端poly(A)尾的特殊閉環結構[7]，且與哺乳動物細胞中微小RNA(miRNAs)和長鏈非編碼RNA(lncRNAs)相比，具有更高的穩定性和序列保守性，是因為它們具有核酸酶抗性。近期大量研究報道，在不同物種中circRNAs均有表達。基于生物信息學分析和高通量測序技術的迅速發展，研究人員發現了數以萬計的circRNAs，發現它們參與血管病變、神經系統疾病、腫瘤等疾病發生發展。CircRNAs 芯片分析技術已應用于許多腫瘤，包括消化系統腫瘤，神經系統腫瘤，泌尿系統腫瘤，頭頸部腫瘤等，如下咽鱗狀細胞癌、喉鱗狀細胞癌、基底細胞癌、胰腺導管腺癌、胃癌、肝細胞癌、甲狀腺乳頭狀癌等。然而，在食管鱗癌中，circRNAs鮮有報道。

目前ESCC尚沒有血漿腫瘤標志物來評估病情，內鏡是金標準，但是創傷大，患者不易接受。

發明內容

為解決上述問題，本發明公開了一種血液中circ-TTC17分子標志物在食管鱗癌診斷試劑的應用，針對目標人群對食管癌內鏡篩查依從性差，以及臨床上確診的食管鱗癌患者絕大多數都是中晚期的現狀提出，在食管鱗狀細胞癌變進程中找到理想的分子預警信號，有針對性的進行內鏡檢查，病理確診，以減輕病人痛苦，避免過度醫療，節省醫療資源。血漿中的 circ-TTC17可作為ESCC患者的血漿標志物，這一檢查方法容易被受檢者接受，更可成為ESCC 患者的早診、病情進展的判斷以及預后評估的有效手段。

為了達到以上目的，本發明供如下技術方案：

一種血液中circ-TTC17分子標志物在食管鱗癌診斷試劑的應用，所述circ-TTC17分子標志物的核苷酸序列為SEQ ID NO.1。所述circ-TTC17分子標志物的ID號為circ_0021771。

在本發明中，診斷食管鱗癌分期中的試劑為實時定量PCR試劑盒。

本發明的根據核苷酸序列為SEQ ID NO.1的circ-TTC17分子標志物設計了2對引物用于檢測該序列，引物核苷酸序列為SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ IDNO.5。

特異性引物分別如下：