[發明專利]雞傳染性支氣管炎基因工程亞單位疫苗

在審

• 申請號: 201910086873.1
• 申請日: 2019-01-29
• 公開（公告）號: CN109985235A
• 公開（公告）日: 2019-07-09
• 發明（設計）人: 曹文龍;孔迪;滕小锘;易小萍;張大鶴
• 申請（專利權）人: 蘇州世諾生物技術有限公司
• 主分類號: A61K39/215
• 分類號: A61K39/215;A61P31/14;C07K14/165;C12N15/50
• 代理公司: 南京利豐知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32256
• 代理人: 王鋒

本申請提供了一種免疫組合物及亞單位疫苗，包含：采用SEQ ID NO:1的核酸分子或者與SEQ ID NO:1的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子以及SEQ ID NO:2的核酸分子或者與SEQ ID NO:2的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子分別編碼的雞傳染性支氣管炎病毒S1蛋白以及S2蛋白，S1蛋白和S2蛋白之間能夠形成異二聚體結構，和病毒表面結構類似，這兩個蛋白使用真核表達，蛋白糖基化充分，抗原蛋白免疫原性好，并且表達量非常高，達到2?3g/L，重組細胞能夠大規模懸浮培養，大大降低了疫苗制備的復雜程度，降低了生產成本。

技術領域

本申請涉及動物免疫藥物技術領域，具體而言，涉及一種雞傳染性支氣管炎基因工程亞單位疫苗。

背景技術

傳染性支氣管炎(Avian Infectious Bronchitis,IB)是由雞傳染性支氣管炎病毒(Avian Infectious Bronchitis Virus,IBV)引起的一種雞的急性、高度接觸傳染性的呼吸道病和泌尿生殖道疾病，以氣管啰音、咳嗽、打噴嚏為主要特征。各種日齡性別和品種的雞都有易感性，但以6周齡以下雛雞更易感染。沒有獲得母源抗體的雛雞感染傳染性支氣管炎病毒后引起永久性的輸卵管損傷，到性成熟喪失產蛋能力，甚至可由于呼吸道或腎臟的感染而死亡。產蛋雞群感染傳染性支氣管炎病毒后導致產蛋量下降，蛋形不整、畸形和質量低下，受精率降低，傳染性支氣管炎還使雞的增重和飼料報酬降低。雖然疫苗的使用對傳染性支氣管炎的流行起到了一定的預防和控制作用，但由于傳染性支氣管炎病毒血清型眾多，不同血清型毒株之間具有較小的交叉保護性甚至無交叉保護性。因此，傳染性支氣管炎目前仍在免疫雞群和非免疫雞群發生和傳播，給養禽業造成了嚴重的經濟損失。

IBV屬于Nido病毒目(Nidovirales)、冠狀病毒科(Coronaviridae)、冠狀病毒屬(Coronavirus)中第三群的成員。病毒基因組由單股不分節段的正鏈RNA組成，長約27.6kb。含有4種結構蛋白，即纖突(Spike，S)糖蛋白、核衣殼(Nucleocapsid，N)蛋白、膜(Membrane，M)糖蛋白和小膜(Small Envelope，E)糖蛋白。

現有專利幾乎均為全病毒滅活疫苗或者活疫苗，比如CN103007272A中所公開的IBV疫苗為活疫苗，通過懸浮細胞培養生產全病毒，需要血清同時存在散毒風險，且抗原表達量低；同時現有的疫苗是用雞胚生產的，雞胚難以處理，易造成污染。CN104353070A公開了一種雞傳染性支氣管炎病毒的基因工程亞單位疫苗及其制備方法，其使用雞支氣管炎病毒H120毒株S1基因和H3N2流感病毒HA2基因融合表達，利用昆蟲桿狀病毒表達系統進行制備，但是昆蟲細胞糖基化和動物細胞存在較大差異。

本發明因此而來。

發明內容

本申請旨在提供一種免疫組合物，以解決現有技術中的問題。

為了實現上述目的，根據本申請的一個方面，提供了一種免疫組合物，包含：

采用SEQ ID NO:1的核酸分子或者與SEQ ID NO:1的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子編碼的雞傳染性支氣管炎病毒重組S1蛋白以及

SEQ ID NO:2的核酸分子或者與SEQ ID NO:2的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子別編碼的雞傳染性支氣管炎病毒重組S2蛋白。

本發明進一步的技術方案是：所述的雞傳染性支氣管炎病毒重組蛋白包含SEQ IDNO:3的氨基酸序列或者與SEQ ID NO:3的全長氨基酸序列95％以上相同的氨基酸序列；以及SEQ ID NO:4的氨基酸序列或者與SEQ ID NO:4的全長氨基酸序列95％以上相同的氨基酸序列。

本發明的另一目的在于提供一種所述的免疫組合物用于生產用于在受試動物中誘導針對雞傳染性支氣管炎病毒抗原的免疫反應的藥劑的用途。