[發明專利]PUB41基因作為負調控因子在提高番茄灰霉病和青枯病抗性中的應用有效
| 申請號： | 201910085963.9 | 申請日： | 2019-01-29 |
| 公開（公告）號： | CN109777810B | 公開（公告）日： | 2020-06-09 |
| 發明（設計）人： | 師愷;顧少涵;胡璋健;邵湘淇;方瀚墨;喻景權 | 申請（專利權）人： | 浙江大學 |
| 主分類號： | C12N15/29 | 分類號： | C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82;C07K14/415 |
| 代理公司： | 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡紅娟 |
| 地址： | 310013 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | pub41 基因 作為 調控 因子 提高 番茄 灰霉病 青枯病 抗性 中的 應用 | ||
【權利要求書】：
1.PUB41基因作為負調控因子在提高番茄灰霉病抗性中的應用，其特征在于，所述PUB41基因的蛋白編碼區的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.PUB41基因編碼的蛋白作為負調控因子在提高番茄灰霉病抗性中的應用，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.PUB41基因作為負調控因子在提高番茄青枯病抗性中的應用，其特征在于，所述PUB41基因的蛋白編碼區的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
4.一種培育抗灰霉病和青枯病的番茄的方法，其特征在于，包括：
(1)在番茄PUB41基因的蛋白編碼區選取含有PAM結構的靶標片段，以靶標片段PAM結構前20bp為依據，進行引物設計，構建CRIPR/Cas9載體；
(2)構建含步驟(1)所述CRIPR/Cas9載體的農桿菌基因工程菌；
(3)將步驟(2)所述基因工程菌轉化番茄子葉，獲得不含外源Cas9蛋白且穩定遺傳的純合突變體株系；
所述PUB41基因的蛋白編碼區的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；
所述靶標片段PAM結構前20個堿基的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；
構建所述CRIPR/Cas9載體的引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示。
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