[發(fā)明專利]一種利用酶標(biāo)儀準(zhǔn)確檢測植物甾醇酯含量的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910085592.4
• 申請日: 2019-01-29
• 公開（公告）號: CN109632786B
• 公開（公告）日: 2021-08-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馮思敏;孫培龍;王章鐵;王丹;邵平
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 杭州天勤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

1.一種利用酶標(biāo)儀準(zhǔn)確檢測植物甾醇酯含量的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)取含植物甾醇酯的待測樣品，加入到溶劑乙酸乙酯中，超聲波處理至植物甾醇酯完全溶解后，得到植物甾醇酯待測液，

步驟(1)中，待測樣品中的植物甾醇酯與乙酸乙酯的質(zhì)量體積比為25～125μg:1mL；

(2)將植物甾醇酯待測液和質(zhì)量濃度為0.0015％～0.015％的磷硫鐵顯色劑混合搖勻后，室溫下顯色，得到顯色液；

(3)取50～300μL的顯色液至于酶標(biāo)儀中進(jìn)行檢測，測得待測樣品的吸光光度值，

步驟(3)中，所述酶標(biāo)儀檢測時的吸收波長為480～500nm；

(4)取植物甾醇酯標(biāo)準(zhǔn)樣品，根據(jù)步驟(1)～(3)，得到不同濃度標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光光度值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線后，得到吸光光度值與植物甾醇酯含量的線性回歸方程；

(5)將步驟(3)中待測樣品的吸光光度值代入步驟(4)的線性回歸方程中，得到待測樣品中植物甾醇酯的含量。

2.如權(quán)利要求1所述的利用酶標(biāo)儀準(zhǔn)確檢測植物甾醇酯含量的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述超聲波處理的時間為5～60min，功率為90～110W。

3.如權(quán)利要求1所述的利用酶標(biāo)儀準(zhǔn)確檢測植物甾醇酯含量的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述磷硫鐵顯色劑的質(zhì)量濃度為0.0015％。

4.如權(quán)利要求1所述的利用酶標(biāo)儀準(zhǔn)確檢測植物甾醇酯含量的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述顯色的時間為25min～2h。

5.如權(quán)利要求1所述的利用酶標(biāo)儀準(zhǔn)確檢測植物甾醇酯含量的方法，其特征在于，所述顯色的時間為25min。

6.如權(quán)利要求1所述的利用酶標(biāo)儀準(zhǔn)確檢測植物甾醇酯含量的方法，其特征在于，步驟(3)中，所述酶標(biāo)儀檢測時的吸收波長為492nm。

7.如權(quán)利要求1所述的利用酶標(biāo)儀準(zhǔn)確檢測植物甾醇酯含量的方法，其特征在于，步驟(4)中，標(biāo)準(zhǔn)曲線中植物甾醇酯的濃度范圍為25～125μg/mL。