[發明專利]一種羰基還原酶DmCR及其編碼基因、重組表達載體、重組表達細胞及其應用在審
| 申請號: | 201910085476.2 | 申請日: | 2019-01-29 |
| 公開(公告)號: | CN109609473A | 公開(公告)日: | 2019-04-12 |
| 發明(設計)人: | 賈振華;宋水山;李冉;宋聰;黃亞麗;趙芊;黃媛媛;黃玉清 | 申請(專利權)人: | 河北省科學院生物研究所 |
| 主分類號: | C12N9/04 | 分類號: | C12N9/04;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/18;C12R1/19 |
| 代理公司: | 北京高沃律師事務所 11569 | 代理人: | 劉奇 |
| 地址: | 050000 河北*** | 國省代碼: | 河北;13 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 羰基還原酶 編碼基因 重組表達細胞 重組表達載體 大腸桿菌 生物催化技術 氨基酸序列 密碼子優化 表達量 丁二醇 酶活力 丁酮 羥基 催化 應用 | ||
1.一種羰基還原酶DmCR,其特征在于,所述羰基還原酶DmCR的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。
2.一種編碼權利要求1所述羰基還原酶DmCR的基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一種羰基還原酶DmCR的重組表達載體,其特征在于,所述重組表達載體包括權利要求2所述的基因。
4.根據權利要求3所述的重組表達載體,其特征在于,所述重組表達載體是將權利要求2所述的基因插入表達載體的多克隆位點得到的。
5.根據權利要求4所述的重組表達載體,其特征在于,所述表達載體包括pET-28a(+)。
6.根據權利要求4或5所述的重組表達載體,其特征在于,所述基因通過羰基還原酶DmCR的基因的引物對擴增得到,所述引物對包括如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。
7.一種羥基還原酶DmCR的重組表達細胞,其特征在于,包括權利要求3~5任意一項所述的重組表達載體。
8.根據權利要求7所述的重組表達細胞,其特征在于,將所述重組表達載體導入到大腸桿菌中,即得羰基還原酶DmCR的重組細胞。
9.權利要求1所述羰基還原酶DmCR、權利要求2所述編碼羰基還原酶的基因、權利要求3~5任意一項所述羰基還原酶DmCR的重組表達載體或權利要求6~7任意一項所述羰基還原酶DmCR的重組細胞在制備(R)-1,3-丁二醇中的應用。
10.根據權利要求9所述的應用,其特征在于,所述制備(R)-1,3-丁二醇的過程中,羰基還原酶DmCR催化4-羥基-2-丁酮生成(R)-1,3-丁二醇的反應。
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