[發明專利]一種利用氣升式環流反應器發酵生產阿維菌素的方法在審
| 申請號: | 201910084779.2 | 申請日: | 2019-01-29 |
| 公開(公告)號: | CN109517865A | 公開(公告)日: | 2019-03-26 |
| 發明(設計)人: | 鄭智新;高鶴永;李軍華;張強;劉文彬 | 申請(專利權)人: | 內蒙古新威遠生物化工有限公司 |
| 主分類號: | C12P19/62 | 分類號: | C12P19/62;C12N1/20;C12R1/465 |
| 代理公司: | 北京精金石知識產權代理有限公司 11470 | 代理人: | 宋秀蘭 |
| 地址: | 014300 內蒙古自治區鄂爾多斯市*** | 國省代碼: | 內蒙古;15 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 氣升式環流反應器 阿維菌素 阿維鏈霉菌 補料培養基 對數生長期 孢子菌懸液 發酵培養 發酵 接種 微生物發酵技術 分批補料發酵 發酵培養基 斜面培養基 種子培養基 孢子懸浮液 發酵容器 分批補料 分批添加 發酵液 孢子 染菌 效價 移種 制備 生產 優化 | ||
1.一種利用氣升式環流反應器分批補料發酵生產阿維菌素的方法,其特征在于,包括以下步驟:
步驟1,將阿維鏈霉菌接種至斜面培養基培養,取孢子斜面,制備成孢子懸浮液;
步驟2,將步驟1中得到的阿維鏈霉菌孢子菌懸液接種到種子培養基,培養至對數生長期;
步驟3,將步驟2中培養至對數生長期的阿維鏈霉菌孢子菌懸液移種至發酵培養基中進行發酵培養;
所述步驟3中發酵培養的反應器為氣升式環流反應器,發酵方式為分批補料發酵。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述分批補料的方式為:發酵進行到120-170h、190-220h和240-290h時,分別加入補料培養基。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于,所述分批補料的方式為:發酵進行到120-170h,總糖低于50g/L,還原糖低于15g/L時;發酵進行到190-220h,總糖低于55g/L,還原糖低于20g/L時;發酵進行到240-290h,總糖低于60g/L,還原糖低于20g/L時;分別加入補料培養基。
4.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,所述補料培養基包含玉米淀粉、消泡劑、碳酸鈣和淀粉酶。
5.根據權利要求4所述的方法,其特征在于,所述補料培養基包含100-500g/L玉米淀粉、0.2-1g/L消泡劑、0.5-5g/L碳酸鈣和0.1-0.5g/L淀粉酶。
6.根據權利要求4-5任一項所述的方法,其特征在于,所述淀粉酶為α-淀粉酶。
7.根據權利要求4-5任一項所述的方法,其特征在于,加入補料培養基后,調節發酵培養基的pH在6.0-8.0范圍內。
8.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述斜面培養基包含葡萄糖、瓊脂粉、牛肉膏和磷酸二氫鉀;所述種子培養基包含玉米淀粉、黃豆餅粉、酵母粉、花生粉、消泡劑;所述發酵培養基包含玉米淀粉、黃豆餅粉、酵母粉、硫酸銨、碳酸鈣和消泡劑。
9.根據權利要求8所述的方法,其特征在于,所述斜面培養基包含5-50g/L葡萄糖、5-50g/L瓊脂粉、5-20g/L牛肉膏和0.1-2g/L磷酸二氫鉀;所述種子培養基包含10-50g/L玉米淀粉、5-50g/L黃豆餅粉、5-20g/L酵母粉、5-20g/L花生粉、0.5-5g/L消泡劑;所述發酵培養基包含50-200g/L玉米淀粉、5-50g/L黃豆餅粉、5-30g/L酵母粉、0.01-1g/L硫酸銨、0.5-5g/L碳酸鈣和1-5g/L消泡劑。
10.根據權利要求8或9所述的方法,其特征在于,所述斜面培養基、種子培養基和發酵培養基的pH均為6.0-8.0。
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