[發明專利]一種同時測定孔雀石綠和結晶紫含量的方法

有效

• 申請號: 201910082937.0
• 申請日: 2019-01-25
• 公開（公告）號: CN109633032B
• 公開（公告）日: 2022-04-05
• 發明（設計）人: 李宏;楊亞玲;李艷艷;田浩;侯朝祥;楊芳;王翰墨;周繼偉
• 申請（專利權）人: 云南省農業科學院農產品加工研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 昆明祥和知識產權代理有限公司 53114
• 代理人: 和琳

本發明公開了一種同時測定孔雀石綠和結晶紫含量的方法。將氯化膽堿和酚混合加熱后作為萃取劑，樣品溶液經水相微孔濾膜過濾后，加入萃取劑和有機硅乳化劑，渦旋形成均勻乳液，靜置后離心分相，取上層萃取相進行高效液相色譜測定。本發明以氯化膽堿和酚制備得到低共熔溶劑作為萃取劑，首創以有機硅乳化劑作為增乳劑，形成的乳液中萃取目標物與萃取劑接觸充分，萃取完全，再結合高效液相色譜方法，能夠同時準確檢測低含量的孔雀石綠和結晶紫。該方法乳液形成快，均勻，相分離操作非常容易，具有高效、低毒、操作簡單、靈敏度高、重現性好的特點。特別適用于魚、蝦、鱉等水產動物體內，以及水體中孔雀石綠和結晶紫殘留的定量分析。

技術領域

本發明屬于有害物質殘留檢測技術領域，具體是涉及一種能夠同時準確測定水產動物體內、及水體中孔雀石綠和結晶紫含量的方法。

背景技術

孔雀石綠和結晶紫同屬于堿性三苯甲烷類染料，具有類似的結構，在水產養殖過程中，常作為殺菌劑和抗寄生蟲藥，用于防治各種魚病。它們在生物體內代謝生成的產物具有高毒性、高殘留和致畸致癌作用。世界上許多國家已將孔雀石綠列為水產養殖禁用藥，我國也宣布了嚴禁在水產養殖中使用孔雀石綠和結晶紫，并規定其不得檢出。孔雀石綠和結晶紫是近年來食用水產品衛生安全中重點監控的有機污染物。

分散液液微萃取是一種集采樣、萃取和濃縮于一體的樣品前處理技術。微量萃取劑在分散溶劑的作用下，在樣品溶液中形成無數微小液滴，由于萃取劑用量少且與水相接觸面積很大，可快速達到傳質平衡，萃取幾乎不受萃取時間的影響，具有操作簡單、快速、費用低、對環境友好等優點，因而在食品樣品前處理及分析中備受關注。但目前以低共熔溶劑進行的液液微萃取的萃取劑主要為疏水性的，由于用量極少，使其與目標分子的接觸相當有限，難以達到好的萃取效果，為此目前報道的方法是加入四氫呋喃作為分散劑，加入量與萃取劑相當，但分散效果并不理想，會導致萃取率及重現性不好等缺點，且四氫呋喃對人體及環境都有一定毒性。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種靈敏度高、重現性好，特別適用于對水產動物體內及水體中殘留的微量孔雀石綠和結晶紫進行準確檢測的方法。

本發明的目的通過以下技術方案予以實現。

除非另有說明，本發明所采用的百分數均為重量百分數。

一種同時測定孔雀石綠和結晶紫含量的方法，其特征在于：取50～100mL樣品溶液，經水相微孔濾膜過濾后，加入0.5～2mL萃取劑和0.5～1mL有機硅乳化劑，渦旋1～2min形成均勻乳液，靜置5～10min后，離心分相，取上層萃取相采用高效液相色譜進行測定；所述的萃取劑的制備方法為：將氯化膽堿和酚按摩爾比1：2～4混合，加熱至70～80℃，形成均勻透明的低共熔溶劑；所述的有機硅乳化劑為TMN-6和TMN-10中的一種。

所述的離心速度為3000～5000rpm，離心時間為5～10min。

所述的酚為苯酚、硝基苯酚和氯苯酚中的一種。

本發明檢測的樣品可以是水產動物的可食用部分，或是養殖水體。

相對于現有技術，本發明具有以下優點：

1、本發明以氯化膽堿和酚制備得到低共熔溶劑作為萃取劑，首創以有機硅乳化劑作為增乳劑，所形成的乳液中萃取目標物與萃取劑接觸充分，萃取完全，且相分離容易，再結合高效液相色譜方法，能夠同時準確檢測低含量的孔雀石綠和結晶紫。

2、由于有機硅乳化劑在紫外光譜下無吸收，能夠使液相色譜檢測基線平穩，干擾小。

3、本發明方法的最大優點在于乳液形成快，均勻，相分離操作非常容易，具有高效、低毒、操作簡單、靈敏度高、重現性好等技術特點。特別適用于魚、蝦、鱉等水產動物體內，以及水體中孔雀石綠和結晶紫殘留的定量分析。

附圖說明