[發明專利]一種治療大腸桿菌耐藥株感染的活性組合物的制備方法

在審

• 申請號: 201910082865.X
• 申請日: 2019-01-28
• 公開（公告）號: CN109568560A
• 公開（公告）日: 2019-04-05
• 發明（設計）人: 孟繁華
• 申請（專利權）人: 孟繁華
• 主分類號: A61K36/9068
• 分類號: A61K36/9068;A61P31/04
• 代理公司: 北京細軟智谷知識產權代理有限責任公司 11471
• 代理人: 張肖

1.一種治療大腸桿菌耐藥株感染的活性組合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)取黃連、石見穿、半枝蓮、干姜、虎杖、訶子依次分別進行清洗、烘干、粉碎，混合后得到粉碎原料；

(2)向所述粉碎原料中加入水，進行煎煮、過濾，得到中藥濾液；

(3)調整所述中藥濾液的碳氮比，得到調整后濾液；

(4)將所述調整后濾液制備為培養基；

(5)取步驟(1)中各中藥植物的莖和葉依次進行消毒、清洗、裁剪，得到待培養物質，將所述待培養物質放入所述培養基中進行培養得到培養產物，將所述培養產物經搖床擴繁、藥效篩選后，得到所述治療大腸桿菌耐藥株感染的活性組合物。

2.根據權利要求1所述的治療大腸桿菌耐藥株感染的活性組合物的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，所述各原料的配比為黃連18％、石見穿17％、半枝蓮16％、干姜19％、虎杖15％、訶子15％。

3.根據權利要求1所述的治療大腸桿菌耐藥株感染的活性組合物的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，所述各原料粉碎至150目-250目。

4.根據權利要求1所述的治療大腸桿菌耐藥株感染的活性組合物的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所述粉碎原料與水的質量比為1:(6-12)；

所述煎煮為文火煎煮，所述煎煮時間為1.5-2.5h。

5.根據權利要求1所述的治療大腸桿菌耐藥株感染的活性組合物的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，使用硫酸銨和葡萄糖將所述中藥濾液的碳氮比調整至(28-32):1。

6.根據權利要求1所述的治療大腸桿菌耐藥株感染的活性組合物的制備方法，其特征在于，步驟(4)中，所述培養基的組份組成為：調整后濾液96.248％-96.448％、葡萄糖1.2％、磷酸氫二鉀0.3％、硫酸鎂0.15％、酵母膏0.1％、維生素B₁0.01‰、維生素B₆0.01‰、瓊脂1.8％-2％。

7.根據權利要求1所述的治療大腸桿菌耐藥株感染的活性組合物的制備方法，其特征在于，步驟(5)中，所述莖和葉的重量為各中藥植物重量的0.5％-1.5％；

所述消毒使用的是濃度為8％-12％的次氯酸鈉，所述消毒時間為8-12min。

8.根據權利要求1所述的治療大腸桿菌耐藥株感染的活性組合物的制備方法，其特征在于，步驟(5)中，將所述莖和葉裁剪至1cm×1cm；

所述培養溫度為30-37℃，所述培養濕度為40％-50％，所述培養時間為5-7天。

9.根據權利要求1所述的治療大腸桿菌耐藥株感染的活性組合物的制備方法，其特征在于，步驟(5)中，所述培養產物進行搖床擴繁時的擴大培養體系組成為：調整后濾液96.048％、培養產物1％、葡萄糖2％、磷酸二氫鉀0.5％、硫酸鎂0.25％、蛋白胨0.2％、維生素B₁0.01‰、維生素B₆0.01‰、L-酪氨酸0.002‰；

所述搖床擴繁的溫度為25-37℃，所述轉速為130-170rpm，所述擴繁天數為3-6天。

10.根據權利要求1所述治療大腸桿菌耐藥株感染的活性組合物在制備治療大腸桿菌耐藥株感染藥物中的應用。