[發明專利]一株枯草芽孢桿菌及其在降解鄰苯二甲酸二丁酯中的應用

有效

• 申請號: 201910079682.2
• 申請日: 2019-01-28
• 公開（公告）號: CN109666612B
• 公開（公告）日: 2022-06-21
• 發明（設計）人: 萬群;徐文君;李易芯;馮發運;余向陽
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A62D3/02;A62D101/28;C12R1/125
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務所 32237
• 代理人: 楊文晰

本發明涉及一株保藏編號為CGMCCNo.16233的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)及其在降解鄰苯二甲酸二丁酯中的應用；該枯草芽孢桿菌可制備成菌劑，應用于葉菜種植體系中土壤源塑化劑殘留污染的修復，以及降低該土壤源塑化劑向葉菜可食用部分的吸收轉運，該枯草芽孢桿菌屬于土壤常見益生菌,能長期定植于蔬菜植株，在不影響蔬菜品質的前提下，高效降低塑化劑殘留，實現綠色安全生產。

技術領域

本發明涉及微生物學與食品安全領域，特別是一株枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)及其在降解鄰苯二甲酸二丁酯中的應用。

技術背景

塑化劑(plasticizer)又稱增塑劑，是一類無色油狀合成化合物，廣泛用于各類塑料產品生產，如涂料、塑料包裝盒或包裝膜、醫護管件、可伸縮玩具、農藥以及聚氯乙烯材料等。作為一種代表性的塑化劑，鄰苯二甲酸二丁酯(Dibutyl phthalate，DBP)的產量高達每年數百萬噸，同時其極容易釋放進入環境，污染生態圈及食物鏈。

由于DBP的揮發性，以及其與塑料產品之間的弱化學鍵，使得食品在包裝和運輸過程中與塑料制品接觸會污染上塑化劑，但最具危害的還是作物在生產過程中吸收進體內的塑化劑殘留。葉菜中殘留積累的DBP是人類DBP暴露的主要來源(Zhang,Y.,Tao,Y.,Zhang,H.,Wang,L.,Sun,G.,Sun,X.,Erinle,K.,Feng,C.,Song,Q.,Li,M.,2015.Effect of di-n-butyl phthalate on root physiology and rhizosphere microbial community ofcucumber seedlings.J.Hazard.Mater.289,9-17.)，長期接觸積累會致癌，干擾內分泌系統以及降低雄性生育能力。因此，鄰苯二甲酸二丁酯已被美國環境保護署(USEPA)列為一種重點污染物。目前已經報道的土壤修復劑主要聚焦在土壤重金屬污染治理修復，以及利用有益微生物群來提高土壤的肥力，專門針對塑化劑，特別是鄰苯二甲酸二丁酯土壤污染進行治理的修復劑還未見報道。

文獻“鄰苯二甲酸二丁酯降解菌株的篩選鑒定及其降解特性研究”(李建龍等，現代食品科技，2014)，公開了一株自土壤中篩選的具有DBP降解功能的枯草芽孢桿菌，但該文獻僅公開了體外降解實驗(培養基條件下的)，并未公開土壤和植株體內降解實驗效果。

隨著人們生活水平的提高，對新鮮蔬菜的需求也越大。而溫室塑料大棚及化學農藥的使用目前是保障葉菜供應的最高效手段，這就不可避免地導致栽種土壤中塑化劑的污染。葉菜的快速生長特性決定了它會通過根部組織從土壤中吸收大部分水分和養料，這伴隨著塑化劑殘留進入葉菜可食用部分，最終被人類食用而危害人體健康。鑒于此，探索有效修復土壤塑化劑殘留污染及尋找阻斷塑化劑從栽種土壤進入葉菜中的方法對于生態環境保護，綠色農業生產及人類可持續發展都顯得十分重要。

發明內容

針對上述問題，本發明提供一株從植物中篩選分離到的植物內生菌枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)，該菌株可針對土壤主要塑化劑鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)進行降解，并可進一步制備為修復劑，能夠有效降解殘留于栽種土壤中的塑化劑污染，進而減少其向葉菜中的吸收轉移，不影響葉菜植株的正常生長，不引入其他污染源。

首先，本發明提供了一株保藏號為CGMCC NO:16233的枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)，申請人將其自命名為HB-T2，芽孢桿菌屬；該菌株分離自多年生本草植物酸模體內，菌株呈棒桿狀,能產芽孢，多數對動植物無害。

其次，本發明還提供了保藏號為CGMCC NO:16233的枯草芽孢桿菌在降解鄰苯二甲酸二丁酯中的應用，特別是在降解土壤或葉菜植株體內鄰苯二甲酸二丁酯污染的應用。