[發明專利]一種抗病砧木根系分泌物收集和提取的方法

在審

• 申請號: 201910079084.5
• 申請日: 2019-01-28
• 公開（公告）號: CN109717212A
• 公開（公告）日: 2019-05-07
• 發明（設計）人: 于文進;趙文宗;陽燕娟;鐘川
• 申請（專利權）人: 廣西大學
• 主分類號: A01N65/38
• 分類號: A01N65/38;A01P1/00;A01G31/00
• 代理公司: 北京君恒知識產權代理事務所(普通合伙) 11466
• 代理人: 韋劍思;黃啟行

本發明公開了一種抗病砧木根系分泌物收集和提取的方法，涉及蔬菜抗病栽培技術、植物代謝產物提取領域，所述的方法包括供試番茄砧木品種進行育苗、水培收集、萃取和濃縮，即得植株根系分泌物，所述供試番茄砧木品種為番砧1號和/或茄砧21號；本發明的方法操作簡單、安全環保，不破壞植株本身，所得根系分泌物純度高，應用于實際生產中可抑制土壤青枯菌的生物活性，從而緩解番茄產區青枯病高發的問題。

技術領域

本發明涉及蔬菜代謝產物提取和抗病栽培技術領域，尤其涉及一種抗病砧木根系分泌物收集和提取的方法。

背景技術

青枯病是由茄科青枯雷爾氏菌(Ralstonia solanacearum E.F.Smith，以下簡稱青枯菌)引起的一種土傳性維管束病害，在我國長江以南尤其是華南地區普遍發生，在茄科作物上危害最為嚴重。番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)營養豐富，產量高，是我國主栽蔬菜品種之一。近年來由于土壤連作、鹽漬化程度加劇，在高溫多雨的環境條件下青枯病極容易大面積蔓延，常造成重大農業經濟損失，常規的化學藥劑和生物防治方法難以根治。目前，采用抗病砧木嫁接是防控青枯病的最有效措施，可顯著降低番茄的田間發病率。其中，抗病砧木的根系分泌物在提高番茄抗病性的過程中起著重要的介導作用。

根系分泌物(Root exudate)是指在特定環境下，活的植物通過根系釋放到根際環境中的物質總稱，主要包括由根部輸出的低分子有機物、根系代謝物、根系脫落形成的高分子粘膠質及殘體分解物等物質。有大量研究表明，植物可通過根系分泌物的作用在根際形成并維持一個特殊的根際微生態環境。植物的種類、品種以及環境條件不同，其根際分泌物組成也不相同，由此根際微生物群落和主要生理種群的數量也隨根系分泌物的變化而發生改變。植物通過根系分泌物與根際微生物之間的這種協同作用在植物抵抗病原微生物侵襲的過程中發揮了重要的作用，與植物的抗病性密切相關。有研究表明，抗病番茄砧木的根系分泌物中含有抑制青枯菌增殖的特異活性物質，通過在田間施用能夠改良土壤微生物群落結構，顯著降低番茄青枯病的發病率。因此，利用抗病番茄砧木的根系分泌物來緩解番茄生產過程中青枯病高發的問題具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于：針對上述存在的問題，提供一種操作簡單、效率高且安全環保的抗病砧木根系分泌物收集和提取的方法。

為了實現上述發明目的，本發明采用的技術方案如下：

一種抗病砧木根系分泌物收集和提取的方法，包括如下步驟：

(1)將供試番茄砧木品種用裝有育苗基質的50孔穴盤進行育苗；

(2)播種后待幼苗長至三葉一心時轉于裝有育苗基質的營養缽中培養，統一進行水肥管理；

(3)幼苗生長至現蕾期后，分別用清水和去離子水將植株根系清洗干凈后放入水培收集裝置的水培槽中進行水培；

(4)連續通氣培養10h后通過水培收集裝置進行收集，即得植株根系分泌物粗液；

(5)植株根系分泌物粗液經定容、過濾后，統一調整成相同濃度，得到植株根系分泌物收集液，保存于4℃條件下備用；

(6)將植株根系分泌物收集液用有機溶劑進行等體積萃取，連續萃取3次，合并有機相，再進行旋轉蒸干，即得所述抗病砧木根系分泌物。

較佳地，所述育苗基質由以下重量份的原料配制而成：泥炭15-20份、椰糠5-15份、珍珠巖5-15份、蛭石1-5份及菇渣發酵物5-15份。

較佳地，所述供試番茄砧木品種為番砧1號和/或茄砧21號。

較佳地，所述水培在人工氣候室內進行，保持室內光源光暗期16h/8h，晝夜溫度26℃/20℃，相對濕度50-60％。

較佳地，所述有機溶劑為乙酸乙酯或二氯甲烷；所述旋轉蒸干在35-45℃的條件下進行。