[發(fā)明專利]一種快速診斷H1N1流感病毒的試劑盒在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910074363.2 | 申請日： | 2019-01-25 |
| 公開（公告）號： | CN109666765A | 公開（公告）日： | 2019-04-23 |
| 發(fā)明（設計）人： | 李招發(fā);汪賽;熊瑩喆;楊會勇;林俊生 | 申請（專利權(quán)）人： | 華僑大學 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12R1/93 |
| 代理公司： | 廈門市首創(chuàng)君合專利事務所有限公司 35204 | 代理人： | 張松亭;陳丹艷 |
| 地址： | 362000 福建省*** | 國省代碼： | 福建;35 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 試劑盒 快速診斷 現(xiàn)場快速檢測 核苷酸序列 羥基萘酚 可視化 雙引物 成環(huán) 富集 擴增 配體 適體 顯色 | ||
1.一種快速診斷H1N1流感病毒的試劑盒，其特征在于：包括如SEQ ID No.1至SEQ IDNo.7所示的序列，其中SEQ ID No.1為H1N1流感病毒的核酸適體序列，SEQ ID No.2至SEQID No.5為成環(huán)反應序列，SEQ ID No.6至SEQ ID No.7為RCA反應體系引物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速診斷H1N1流感病毒的試劑盒，其特征在于，所述RCA反應體系每50μL中包括：
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速診斷H1N1流感病毒的試劑盒，其特征在于，所述RCA反應體系每50μL中包括：
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速診斷H1N1流感病毒的試劑盒，其特征在于：所述H1N1流感病毒的核酸適體序列SEQ ID No.1分別采用H1N1完整病毒顆粒和B型流感病毒顆粒進行點雜交實驗進行驗證。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速診斷H1N1流感病毒的試劑盒，其特征在于：所述H1N1流感病毒的核酸適體采用磁珠-多價適體。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種快速診斷H1N1流感病毒的試劑盒，其特征在于：所述磁珠-多價適體捕獲H1N1流感病毒的緩沖液組分為0.5M NaCl、20mM Tris-HCL和1mM EDTA，緩沖液pH＝7.5。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速診斷H1N1流感病毒的試劑盒，其特征在于：所述成環(huán)反應步驟為在H1N1病毒顆粒的裂解液中加入SEQ ID No.4和SEQ ID No.5所示的序列，及15μL ddH2O于PCR管中，95℃反應4～6min,37℃放置12～18min,加入3μL 10×T4 DNA ligasebuffer、1μL 400U/μL T4 DNA連接酶,置25℃反應1h，反應結(jié)束后加入0.5μL 5U/μL核糖核酸酶A，37℃反應8～12mim。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種快速診斷H1N1流感病毒的試劑盒，其特征在于：所述裂解液包括磁分離的H1N1病毒樣品和10mM Tris-HCl、2.5mg/mL蛋白酶K，裂解液pH＝7.5。
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