[發明專利]一種利用多孔金納米球檢測腫瘤細胞的方法

有效

• 申請號: 201910073469.0
• 申請日: 2019-01-25
• 公開（公告）號: CN109738417B
• 公開（公告）日: 2020-02-18
• 發明（設計）人: 王建秀;胡盛強;衣馨瑤;童柳娟;胡藍雙
• 申請（專利權）人: 中南大學
• 主分類號: G01N21/71
• 分類號: G01N21/71;G01N15/10
• 代理公司: 長沙永星專利商標事務所(普通合伙) 43001
• 代理人: 何方

1.一種利用多孔金納米球檢測腫瘤細胞的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1) 多孔金納米球的制備；

(2) 將步驟(1)所得多孔金納米球與巰基修飾的適配體進行共孵育，制得功能化的多孔金納米球；

(3) 將步驟(2)所得功能化的多孔金納米球與樣本細胞結合，除去未結合的多孔金納米球，制得細胞待測樣；

(4) 向步驟(3)所得細胞待測樣中加入碳酸氫鹽溶液，在808 nm激光下進行照射，通過監測反應體系中氣壓的變化，區分出腫瘤細胞和正常細胞，同時得到該腫瘤細胞實際數目；

所述多孔金納米球通過以下方式得到：

1) 以聚乙烯吡咯烷酮為穩定劑，氯金酸及硝酸銀分別作為金源和銀源，對苯

二酚作為還原劑，合成金銀復合納米球；

2)以濃氨水溶解金銀復合納米球中的銀原子，經離心、洗滌、再分散，制得多孔金納米球；

所述碳酸氫鹽溶液為碳酸氫銨溶液，其濃度為1 M。

2.根據權利要求1所述的利用多孔金納米球檢測腫瘤細胞的方法，其特征在于，所述多孔金納米球的制備過程為：

) 依次將0.15～0.20 g聚乙烯吡咯烷酮、120～560 μL對苯二酚、10～100 μL硝酸銀、640 μL氯金酸混合，并用二次水定容至18 mL，37℃搖床下劇烈震蕩5分鐘后，靜置90分鐘；

) 隨后，加入200 μL濃氨水后繼續震蕩2 h，經離心、洗滌、再分散，即得所述的多孔金納米球。

3.根據權利要求2所述的利用多孔金納米球檢測腫瘤細胞的方法，其特征在于，所述對苯二酚的濃度為50 mM。

4.根據權利要求2所述的利用多孔金納米球檢測腫瘤細胞的方法，其特征在于，所述硝酸銀的濃度為60 mM。

5.根據權利要求2所述的利用多孔金納米球檢測腫瘤細胞的方法，其特征在于，所述氯金酸的濃度為25 mM。

6.根據權利要求1～5中任一項所述的利用多孔金納米球檢測腫瘤細胞的方法，其特征在于，所述多孔金納米球的直徑為150～550 nm。

7.根據權利要求1所述的利用多孔金納米球檢測腫瘤細胞的方法，其特征在于，步驟(4)中，通過監測該反應體系中氣壓的變化，具體為：

若反應體系中氣壓不斷增大，則樣本細胞為腫瘤細胞，且氣壓的變化值與腫瘤細胞數量成正比；

若反應體系中氣壓不變，則樣本細胞為正常細胞。