[發(fā)明專利]重編程產(chǎn)生功能性去甲腎上腺素能神經(jīng)元的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910072527.8
• 申請日: 2019-01-25
• 公開（公告）號: CN111484977B
• 公開（公告）日: 2023-05-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 程樂平;李三蘭;饒志萍;石玉含;劉月光;袁嘉成
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院腦科學(xué)與智能技術(shù)卓越創(chuàng)新中心
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12Q1/02;A61K35/30;A61P25/00;A61L27/38
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

1.一種產(chǎn)生去甲腎上腺素能神經(jīng)元的方法，包括在非神經(jīng)元細(xì)胞中表達外源的以下轉(zhuǎn)錄因子：

Ascl1，Phox2b，Gata3，Hand2；以及

選自AP-2α和Nurr1之一或兩種；

其中，所述Gata3、AP-2α還包括同源物或類似物；所述的Gata3的同源物或類似物為Gata2；所述的AP-2α的同源物或類似物為AP-2β。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，還在細(xì)胞中表達外源的以下轉(zhuǎn)錄因子：Phox2a。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的非神經(jīng)元細(xì)胞為體細(xì)胞。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述的體細(xì)胞包括：成纖維細(xì)胞，星形膠質(zhì)細(xì)胞，上皮細(xì)胞，血液細(xì)胞。

5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在非神經(jīng)元細(xì)胞中表達所述外源的轉(zhuǎn)錄因子的方法是：

(a)?提供細(xì)胞；

(b)?用表達載體將所述的轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)入(a)的細(xì)胞中，或通過蛋白轉(zhuǎn)染將所述的轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)入(a)的細(xì)胞中；

(c)?培養(yǎng)(b)獲得的細(xì)胞。

6.一種去甲腎上腺素能神經(jīng)元或其培養(yǎng)物，其由權(quán)利要求1-5任一所述的方法獲得。

7.如權(quán)利要求6所述的去甲腎上腺素能神經(jīng)元或其培養(yǎng)物，其特征在于，所述去甲腎上腺素能神經(jīng)元具有如下一種或多種性能：

1)?釋放去甲腎上腺素；

2)?表達去甲腎上腺素能神經(jīng)元的標(biāo)志分子Dbh，Th；

3)?表達去甲腎上腺素能神經(jīng)元的標(biāo)志分子Ddc，Vmat2，Slc6a2，Galanin，Npy，Htr3a，Ret；

4)表達去甲腎上腺素能神經(jīng)元的標(biāo)志分子Th、Dbh、Vmat2、ddc、Net、Map2、Npy、Gal、Ret；

5)?表達去甲腎上腺素能神經(jīng)元的標(biāo)志分子Synapsin?I、Ddc、Vmat2、Net、Galanin、Npy；

6)?具備神經(jīng)元的基本電生理特征，包括：膜阻抗、靜息膜電位、在去極化的刺激下能夠產(chǎn)生動作電位，并且能夠記錄到由于鈉通道開放而產(chǎn)生的鈉電流，能夠接受其他細(xì)胞的輸入并產(chǎn)生輸出；

7)?能夠與靶細(xì)胞或者靶器官建立突觸聯(lián)系并支配其活動。

8.?權(quán)利要求6或7所述的去甲腎上腺素能神經(jīng)元或其培養(yǎng)物的用途，用于：

制備預(yù)防或治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物；或

作為體外模型，進行神經(jīng)系統(tǒng)疾病的模擬及其藥物的篩選；或

制備體內(nèi)細(xì)胞移植的組合物。

9.一種組合物，其特征在于，所述組合物含有：權(quán)利要求6或7所述的去甲腎上腺素能神經(jīng)元或其培養(yǎng)物，以及藥學(xué)上可接受的載體。