[發明專利]一種卵巢癌的診斷標志物及其應用

有效

• 申請號: 201910071936.6
• 申請日: 2019-01-25
• 公開（公告）號: CN109709328B
• 公開（公告）日: 2020-03-17
• 發明（設計）人: 傅志勤;魯超;汪軍堅;章杰捷;張翔;于愛軍;陳雅卿;朱筧青
• 申請（專利權）人: 浙江省腫瘤醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N33/574
• 代理公司: 寧波鄞州全方專利商標事務所(普通合伙) 33242
• 代理人: 樓瑜舟;劉永斌

本發明首次發現了myocilin基因及其表達產物在卵巢癌組織中異常表達，通過基因水平的定量檢測實驗和蛋白水平的免疫組化實驗，證明myocilin在卵巢癌腫瘤組織中與正常組織中差異表達具有統計學意義，可以作為臨床診斷卵巢癌的有效標志物。

技術領域

本發明屬于分子生物學領域，具體涉及癌癥的診斷/分級/分期和預后的領域，更具體來說，本發明涉及卵巢癌的領域。本發明還涉及了包括生物標志物表達的卵巢癌診斷、分級、分期和預后領域，并且還提供了相關的分析試劑、診斷模型、測試試劑盒和臨床分析。

背景技術

卵巢癌是我國女性病死率最高的婦科腫瘤，據中國癌癥年報統計，2015年約有5.21萬新患病患者，同年約有2.25萬人死于卵巢癌。隨著我國人口老齡化日益進展，卵巢癌的發病率逐年提升，并且發病年齡有年輕化的趨勢。在全球范圍內，卵巢癌的發病率位于婦科腫瘤的第三位，僅次于宮頸癌和子宮內膜癌，死亡率位于婦科腫瘤的第二位；在發達國家中，卵巢癌的死亡率位于婦科腫瘤首位。

卵巢癌多發于圍絕經期的女性，約有60％～70％的患者發現疾病時已經進展為III－IV 期或已發生腹部轉移。由于患者早期癥狀不明顯，通常在晚期才會表現出腹痛、腹脹、腹部包塊、消化系統癥狀以及腫瘤壓迫等癥狀和體征，因此大部分卵巢癌患者在發病中晚期才能得到診斷。盡管卵巢癌的手術治療技術以及放化療手段不斷進展，但疾病的5年生產率仍低至30％，且預后差。

目前最常用早期診斷方式包括經陰道彩色多普勒超聲、血清CA125等檢查方法。然而臨床實踐表明，以上方法尚存在局限性:B超診斷卵巢癌的準確性較低，難以發現微小腫瘤，且受操作者主觀因素影響較大；血清CA125檢查特異性及敏感性較低。

進入21世紀以來，隨著分子生物學的發展，陸續有多種關于卵巢癌的診斷標志物被開發，如2016年Dayyani F等的一項系統性回顧，納入了5篇文獻、1 975個研究對象，分析結果表明CA125診斷卵巢癌的敏感性和特異性分別為0.796(95％CI:0.663～0.885)和0.825(95％CI:0.662～0.919)。然而CA125檢測在早期卵巢癌患者的診斷中表現欠佳，且受月經及妊娠等因素的影響較大；。美國食品藥品管理局(food and drug administration，FDA)已經批準將HE4和CA125用于卵巢癌的檢測。現主要通過ELISA技術作為HE4的檢測手段。Dayyani F等的一項研究表明，血清HE4用于檢測卵巢癌的敏感性和特異性分別為0.817(95％CI:0683～0.902)和0.851(95％CI:0.716～0.928)；Simon I等設計了一種雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗用以檢測血液中共刺激分子B7同源體4(B7-H4)的水平，發現卵巢癌患者血液B7-H4水平明顯增高，B7-H4和CA125聯合診斷卵巢癌敏感性和特異性可分別達到65％和97％，高于CA125單獨診斷；另外還有研究表明，甲殼質酶蛋-40((YKL-40)在乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌中均有較高的表達，并且在腫瘤的發生、發展中起到重要的作用；Resnick KE等通過檢測28例漿液性卵巢癌患者的血清標本和15例正常對照組的血清標本，發現卵巢癌患者血清中miR-21、miR-29b、miR-92、miR-93和miR-126水平較高，其中miR-21、miR-92和miR-93在CA125升高前即有顯著的上調，表明這三種microRNA 可用于卵巢癌的早期診斷；另外，還有研究表明多個非編碼長鏈RNA也在卵巢癌中有異常表達，如多種lncRNA都在卵巢癌中表現出了失調，研究顯示，對比健康組織，卵巢腫瘤組織中有多個lncRNA上調，如ANRIL、AB073614、BCYRN1、CCAT1、FALI等。

近期的研究則顯示組合型標記物及基于血清標志物建立的卵巢癌風險評估模型，能增加其特異性和敏感性，從而提高卵巢癌的早期診斷率，因此我們在以后的研究中，也應更加關注多種標志物的組合檢驗及更有效的評估模型。同時，CA-125也并不適合在人群中進行大規模篩查，所以我們需要尋找更加敏感以及信息更豐富的生物標志物。