[發明專利]一種苦楝愈傷組織的培養方法

有效

• 申請號: 201910068166.X
• 申請日: 2019-01-24
• 公開（公告）號: CN109717077B
• 公開（公告）日: 2021-11-30
• 發明（設計）人: 項艷;羅霜霜;胡文芳;何婷;王雅梅
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 合肥興東知識產權代理有限公司 34148
• 代理人: 王偉

1.一種苦楝愈傷組織的培養方法，其特征在于，包括如下具體步驟：

(1)外植體的預處理：

選取新鮮的當年生、且具有耐淹優良性狀的苦楝葉片作為外植體，并采用洗衣粉沖洗1min；接著，流水沖洗2h，直至外植體表面無殘留污垢；最后，將其置于超凈工作臺中，并用75％乙醇溶液浸泡30s，迅速倒出乙醇溶液后，無菌水沖洗5次，備用；

(2)外植體的消毒：

將預處理后的苦楝葉片，采用1％次氯酸鈉溶液消毒5min，再用無菌水沖洗5次，最后用無菌濾紙吸干水分，即得接種所需的無菌外植體；

(3)愈傷組織的培養：

在無菌條件，將步驟(2)中所得的無菌葉片切成1cm×1cm的小片，接著，將其形態學下端直接放入培養瓶中進行愈傷組織的誘導培養，培養15-20天，即得目標所需的愈傷組織；其中，培養瓶中添加的誘導培養基為：MS+1.5mol/L6-BA+0.5mol/L NAA+25g/L蔗糖+7g/L瓊脂+0.8g/L PVPK-60，pH5.8；培養條件為：培養溫度25±1℃，光照時間14-16h/d，光照強度1500-2000Lx。

2.根據權利要求1所述的苦楝愈傷組織的培養方法，其特征在于，所述步驟(3)中，每個培養瓶中接種3個切割后的無菌外植體。

3.根據權利要求1所述的苦楝愈傷組織的培養方法，其特征在于，所述步驟(3)中，培養條件具體為：培養溫度25℃，光照時間15h/d，光照強度1750Lx。