[發明專利]circ_3480在制備鼻咽癌治療制劑中的應用和治療制劑

有效

• 申請號: 201910066567.1
• 申請日: 2019-01-24
• 公開（公告）號: CN109847064B
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 譚怡忻;郭燦;王憶安;張姍姍;龔朝建;范春梅;唐艷艷;伍旭;周鳴;熊煒;曾朝陽;李小玲;李桂源
• 申請（專利權）人: 中南大學
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61K31/713;A61P11/02;A61P11/04;A61P35/00
• 代理公司: 長沙市融智專利事務所(普通合伙) 43114
• 代理人: 袁靖

本發明屬于腫瘤分子生物學技術領域，具體涉及circ_3480在制備鼻咽癌治療制劑中的應用和治療制劑。由于siRNA具有良好的沉默效果，本發明在確保circ_3480被干擾掉后，在沉默了circ_3480的鼻咽癌細胞系HONE1、HNE2和CNE2中進行MTT實驗，相對于NC組，siRNA組細胞的增殖速度明顯減慢，即沉默circ_3480抑制了鼻咽癌細胞的增殖。即抑制circ_3480能治療鼻咽癌，具有深遠的臨床意義和重要的推廣應用前景。

技術領域

本發明屬于腫瘤分子生物學技術領域，具體涉及一種抑制環狀RNA circ_3480的試劑及其在制備鼻咽癌治療制劑中的應用。

背景技術

目前環狀RNA(Circular RNA)是個研究熱點，circRNA主要來源于蛋白質編碼基因的外顯子區，也可以由內含子區、UTR區、基因間區、非編碼RNA位點及已知轉錄物的反義位點形成。CircRNA是由前體mRNA(precursor messenger RNA,pre-mRNA)反向拼接而形成的一類不具有5‘末端帽子和3’末端poly(A)尾巴并以共價鍵形成環形結構的非編碼RNA分子。

CircRNA形成過程可以分為兩大類，即外顯子環化(exon circularization)和內含子環化(intron circularization)兩大機制。Jeck等提出外顯子來源的circRNA(exoniccircRNA,ecircRNA)可以分為套索驅動環化(lariat-driven circularization)和內含子配對驅動環化(intron-pairing-driven circularization)兩種形成方式，套索驅動環化是外顯子3’端作為剪接供體(splice donor)攻擊5’端剪接受體(splice receptor),Alu區共價結合而形成套索結構，套索結構進行內部拼接后切除內含子形成circRNA；內含子配對驅動環化是兩個內含子堿基互補配對形成環狀結構后，剪除內含子形成circRNA。其實內含子本身也可以環化，可以形成內含子來源circRNA(circular intronic RNA,ciRNA)。CircRNA是由前體mRNA反向拼接而形成的一類不具有5‘末端帽子和3’末端poly(A)尾巴并以共價鍵形式形成的封閉環形結構的非編碼RNA分子。有著高度的穩定性、保守性、特異性，并且含量高的特點。

CircRNA最早在1976年于RNA病毒中首次發現，隨后Hsu MT等人使用電子顯微鏡技術在猴的腎細胞質中發現了circRNA的存在。在1996年，circRNA在人類細胞中被發現，隨著RNA-seq新一代測序技術的發展，近年來越來越多的circRNA被發現，目前為止已知的circRNA數目已經達到三萬多個。CircRNA也不再被認為是錯誤的RNA轉錄本，而是作為非編碼RNA研究中的耀眼之星冉冉升起。篩選和驗證更多的新型circRNA作為腫瘤診斷和預后的生物標志物及其應用，并能盡早在專利領域得到好的保護，能顯著提升我國在該技術領域的國際競爭力。

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)屬于頭頸部腫瘤，起源于鼻咽部上皮組織。一般在鼻咽部的后外側隱窩(羅森繆勒窩，Fossa of Rosenmüller)處發病，此處的鼻咽癌細胞易侵襲鄰近的組織和器官。由于鼻咽癌的發生發展是由積累的家族遺傳和體細胞遺傳突變及表觀遺傳學突變導致的多階段復雜基因調控過程，涉及到原癌基因和抑癌基因的激活和沉默、及ncRNA參與的表觀遺傳學調控等等。所以鼻咽癌發生發展的具體分子機制尚不明確，而且由于腫瘤異質性和個體差異性，傳統的放療聯合化療的療效不顯著。因此通過circRNA探究其與鼻咽癌發生發展機制，進一步為鼻咽癌的診斷，以及控制鼻咽癌增殖、侵襲和轉移將是研究的熱點。

我們對鼻咽癌細胞5-8F進行RNA-seq中檢測到一個長度425bp的circ_3480。通過試驗發現該環狀RNA與鼻咽癌的發生發展存在關聯，有可能作為鼻咽癌診斷標記物，以及治療的靶點。

發明內容